miRNAs在胰腺癌耐药调控网络中的作用机制研究

The development of chemoresistance remains the major cause of poor prognosis in pancreatic cancer.Based on the cancer stem cells (CSCs)hypothesis,miRNAs play critical roles in drug resistance by aberrant regulation of CSCs self-renewal and epithelial-mesenchymal transition(EMT) acquisition.We postulate that miRNA-autophagy-EMT-CSCs comprises a complicated network that regulates drug sensitivity in pancreatic cancer.Our aims are to elucidate the funcion of miRNAs related to multi-chemoresistance in the modulation of CSCs、EMT and autophagy,we will further establish xenograft mice models by using established human pancreatic cancer cell lines as well as detect the miRNA expression level of resected specimes to identify the potential value of assessing chemosensitivity.No similar reports are being retrieved.

化疗耐药是导致胰腺癌预后差的主要原因之一，根据肿瘤干细胞理论，miRNA对胰腺癌干细胞、EMT的异常调控可能是导致胰腺癌化疗耐药的重要因素，因此我们推测miRNA-自噬-EMT-肿瘤干细胞构成了复杂耐药调控网络，miRNA在该网络中发挥核心作用。本实验通过化疗耐药中起关键作用的miRNA在胰腺癌干细胞、EMT和自噬中作用，明确miRNA的调控机制；通过动物实验探索miRNA的潜在治疗价值，并对手术切除后化疗患者的标本进行检测，验证特定miRNA作为临床预测胰腺癌化疗敏感性指标的价值。经检索国内外未见同类报道。

研究背景：miRNA对胰腺癌干细胞、EMT 的异常调控可能是导致胰腺癌化疗耐药的重要因素，本课题主要探索耐药相关miRNA在自噬-EMT-肿瘤干细胞-化疗耐药调控网络中的作用和机制。方法：通过体内体外实验研究miRNA对胰腺癌细胞化疗敏感性、自噬活性、EMT表型及胰腺癌干细胞的调控作用， 探索miRNA调控胰腺癌化疗耐药的靶基因及相关信号通路，阐述miRNA 作为治疗靶点的潜在价值。同时检测人胰腺癌组织标本中miRNA表达水平，评估miRNA 作为胰腺癌预后指标的临床应用价值。结果：①miR-497可增加胰腺癌细胞对化疗药物的敏感性，抑制肿瘤细胞的增殖、迁移及侵袭和促进凋亡，并下调胰腺癌干细胞标志物的表达；miR-497调控化疗耐药的分子机制是通过抑制其靶基因IGF-1R、Pim-1、FGF2及FGFR1的表达进而抑制IGF-1R/AKT、AKT/mTOR和RAS/ERK信号通路的激活；进一步深入研究发现，miR-497调控胰腺癌干细胞标志物的表达变化的机制可能是通过Pim-1\EGFR通路介导，抑制Pim-1的表达可下调胰腺癌干细胞标志物的表达；miR-497表达水平与Pim-1表达水平存在负相关性，miR-497在癌组织中的表达降低，Pim-1在癌组织中的表达升高，miR-497低表达和Pim-1高表达是患者预后不良的独立危险因素。同时，胰腺癌患者血浆Pim-1的表达水平具有辅助诊断价值。②miR-10a-5p可降低胰腺癌细胞对化疗药物的敏感性，促进细胞的迁移及侵袭，并调控胰腺癌细胞EMT、肿瘤干细胞和自噬活性相关蛋白的表达；同时，miR-10a-5p调控胰腺癌化疗耐药的机制可通过抑制其靶基因TFAP2C从而抑制EMT驱动因子ZEB1、Snail及Slug等表达介导；进一步深入研究发现，miR-10a-5p调控胰腺癌细胞EMT 的机制可能是通过TFAP2C\c-Myc通路介导，抑制TFAP2C的表达可下调胰腺癌EMT标志物的表达。结论：①miR-497/Pim-1通路参与调控胰腺癌化疗耐药机制与肿瘤干细胞相关，miR-497/Pim-1可以作为胰腺癌潜在的治疗靶点和判断患者预后的肿瘤标志物。②miR-10a-5p/TFAP2C通路参与调控胰腺癌化疗耐药机制与EMT相关，miR-10a-5p/TFAP2C可以作为胰腺癌潜在的治疗靶点。