microRNA-486 在非小细胞肺癌发生及进展中的作用及其机制研究

microRNA调控作为一种新的肿瘤相关分子机制，在肿瘤的发生发展、侵袭与转移以及治疗等方面具有重要作用。我们前期的研究显示，miR-486为非小细胞肺癌(NSCLC)中显著稳定低表达的microRNA，并且其检测在NSCLC的早期诊断方面具有重要的临床实用价值。但目前有关miR-486在肺癌中表达降低的意义和作用机制尚未见报道。本研究拟在前期工作的基础上，利用体内外实验并结合临床样本中miR-486的表达情况，明确其在NSCLC中的作用。在此基础上，利用microRNA生物信息技术对其靶基因进行筛选。采用双荧光素酶报告基因检测系统以及miR-486模拟物/抑制剂转染细胞，证实其作用的靶基因，并进一步探讨各靶基因在NSCLC的作用及机制，从而系统地阐明miR-486在NSCLC中所发挥的作用及其调控机制。研究结果可为肺癌的病因研究奠定理论基础，为今后针对肺癌的基因治疗提供可能的新靶点。

项目按照计划书内容完成，并取得了以下成果：1）在国内外首次报道了miR-486（5p）在非小细胞肺癌中起到抑癌基因的作用，其低表达促进肿瘤的增殖、侵袭和转移，参与调控非小细胞肺癌的形成和进展过程。2）采用miRNA靶基因预测技术、报告基因的构建、双荧光素酶检测系统以及细胞转染等方法，证实了ARHGAP5、Pim-1以及p85α为miR-486（5p）作用的重要靶基因。3）作为miR-486（5p）的靶基因，ARHGAP5在非小细胞肺癌中高表达促进肿瘤的侵袭与转移过程，发挥癌基因作用。本研究首次揭示了miR-486-5p/ARHGAP5通路为肺癌进展以及淋巴结转移的重要机制之一。4）作为miR-486（5p）调控的靶基因，Pim-1在非小细胞肺癌中发挥重要的癌基因作用，参与肿瘤的生长、侵袭与转移以及耐药等过程。除外miR-486在转录后水平对Pim-1表达的调控，我们发现eIF4E可在翻译水平促进Pim-1表达。因此，miR-486在肺癌中表达的降低以及eIF4E在肺癌中表达的增加均为引起Pim-1蛋白表达增加的重要机制。. 通过本项目的研究工作，阐明了miR-486不仅为非小细胞肺癌中显著低表达的miRNA，并且揭示了其表达下降在肺癌的发生以及发展等过程中发挥重要作用；证实了Pim-1、ARHGAP5以及p85α为miR-486参与调控非小细胞肺癌的重要作用机制；明确了Pim-1、ARHGAP5基因在非小细胞肺癌发生和发展中为癌基因的作用，其高表达参与肺癌的发生及进展过程。研究结果丰富了有关miRNA在非小细胞肺癌发生发展中的相关机制研究，也提示了miR-486-5p在肺癌治疗中的潜在意义，为进一步探求其在肺癌基因治疗中的靶点作用奠定了基础。