加味过敏煎不同组分对膜性肾病大鼠模型足细胞损伤的影响及免疫调节机制

内蒙古地区名中医朱宗元教授经多年临床实践凝结而成的经验方加味过敏煎治疗慢性肾炎疗效显著，前期实验研究加味过敏煎对阿霉素肾病大鼠组织有良好的修复作用。因此，本课题拟选取加味过敏煎作为治疗用药，以对激素治疗不敏感的膜性肾病为研究范例，用阳离子化牛血清蛋白（C-BSA）制作经典膜性肾病大鼠模型，以足细胞的形态结构、数量以及裂孔膜蛋白Nephrin 和Podocin的表达等指标来观察加味过敏煎及不同组分对其足细胞损伤的影响，并检测免疫器官（如脾脏、胸腺等）、免疫细胞（如CD4细胞、CD8细胞计数及其比值等）、免疫分子（如TGF-β、IL-4、IL-10、IFN-γ等）等不同层次指标，研究其不同组分对膜性肾病的免疫调节机制，寻求不同组分的不同作用靶点，为加味过敏煎的进一步优化和推广应用提供实验依据。

国家级名老中医朱宗元教授经多年临床实践总结出治疗慢性肾炎的临床经验，以“固本——清源——截流”为基本思路，以“调理开合、健脾益肾、活血化瘀”为主要治疗大法，其经验方在临床中疗效显著。前期实验研究表明该方对阿霉素肾病有良好的修复作用。本项目研究据其经验方化裁而来的处方加味过敏煎，该方以过敏煎为基础方，加入健脾益肾、活血化瘀组分而成。我们以激素治疗不敏感的膜性肾病为范例，用阳离子化牛血清蛋白尾静脉注射制作经典大鼠膜性肾病模型，观察加味过敏煎及其不同组分对膜性肾病大鼠蛋白尿的影响作用以及肾脏的病理改变，以免疫组化方法检测足细胞裂孔膜蛋白Nephrin 和Podocin的表达来探求其逆转蛋白尿的机制；并用流式细胞方法检测免疫细胞CD4/CD8及其比值、免疫分子（TGF-β,IL-4,IL-10,IFN-γ)来研究其免疫调节机制。结果显示，加味过敏煎不同组分对于C-BSA肾病模型的24h尿蛋白定量有显著的缓解作用，其中调理开合组和活血化瘀组对于减轻尿蛋白效果相对较好；活血化瘀组分对于IL-4、 IL-10指标趋向正常组恢复效果较明显，健脾益肾组分和活血化瘀组分对INF-γ的作用较明显；全方组对TGF-β的恢复作用较明显，调理开合组和健脾益肾组对本指标的调节也有一定的作用，而活血化瘀组分对TGF-β的恢复无影响作用。加味过敏煎组方能够一定程度上恢复阳离子化牛血清蛋白造模导致的肾脏病理改变以及Nephrin 和Podocin的表达的缺失和紊乱，是其逆转蛋白尿的机理之一。该研究对老中医经验方进行拆方研究，以不同组分的作用对比来探索其治疗疗效差异机制以及相关适应症，力求对经验方的临床优化方案提供思路。但在研究过程中，由于分组较多，实验工作量较大，不能完全达到预想的效果，希望在进一步的实验研究过程中能够总结经验，有所突破。