自噬与CD4+CD25+调节性T细胞在PCV2持续性感染中的作用

猪圆环病毒2型（PCV2）具有持续性感染特性，可导致猪免疫功能抑制，对全球养猪生产构成了严重威胁。自噬和CD4+CD25+调节性T细胞（Tregs）在病原持续性感染与机体抗感染免疫中起着重要作用。本项目着眼于自噬与Tregs在PCV2持续性感染中的作用，拟建立自噬激动（Aut+）、自噬抑制（Autˉ）及Tregs重要表面分子Foxp3缺失（Foxp3ˉ）的小鼠模型；在细胞和分子免疫水平上，研究PCV2感染不同小鼠模型的自噬反应和Tregs功能的变化及其引起的树突状细胞、CD4+和CD8+ T细胞免疫功能的相应改变与PCV2特异性抗体水平、血清和组织中病毒载量的关系，揭示自噬和Tregs在PCV2持续性感染中的作用和地位，诠释自噬与Tregs之间的相互作用对PCV2持续性感染的影响。该研究成果将为进一步阐明PCV2的持续性感染与致病机制奠定基础，为PCV2新型疫苗和治疗制剂的研究提供新思路。

猪圆环病毒 2 型（PCV2）引起的猪圆环病毒相关疾病是广泛损害猪多个器官的系统性疾病，严重威胁着全球养猪生产的健康发展。PCV2在宿主体内引起持续性感染，导致猪免疫功能抑制和继发感染，但目前PCV2的致病机制尚不清楚。自噬和 CD4+CD25+调节性 T 细胞（Tregs）在多种病原持续性感染与机体抗感染免疫中起着重要作用。为了解析自噬与Tregs在PCV2持续性感染中的作用，本研究通过体内外实验证实，PCV2可以诱导PK-15细胞及猪、小鼠细胞的自噬囊泡增加，引起自噬标志物LC3和Beclin的表达升高；自噬增强在体内外均可以促进PCV2增殖，导致PCV2感染小鼠脾脏CD11c+树突状细胞（DC）在感染后1 d的吞噬功能提高；促进肿瘤坏死因子（TNF-α）的分泌，抑制IFN-α的分泌；引起DC表面抗原递呈相关分子CD40、CD137L、CD80/CD86的表达降低；使DC刺激CD4+ T细胞分泌IFN-γ、IL-12和IL-4、CD8+ T细胞分泌IFN-γ和IL-2的水平升高；引起T细胞活化信号CD28+和CD154+分子的表达降低，抑制信号CD152+的表达升高。通过Foxp3表达和基因干扰实验发现，PCV2感染引起Foxp3分子表达量增加，其变化趋势与病毒载量的变化趋势相关，Foxp3表达的增加导致CD+CD25+ Tregs增殖活性升高，CD8+ T细胞的增殖活性下降，引起血清免疫抑制性细胞因子（IL-10和TGF-β1）和炎症细胞因子（IL-17A）的分泌增加。上述结果表明，PCV2引起细胞自噬和CD+CD25+ Tregs免疫调节活性增强，导致T细胞激活信号降低和抑制信号升高、CD+CD25+ Tregs活性增强，这可能是导致机体免疫抑制、不能彻底清除病毒，造成PCV2持续性感染的重要原因。该研究结果可以为深入揭示PCV2的致病机制和新型疫苗设计提供重要科学依据。