文蛤抗肿瘤蛋白MML抗微管聚合的分子机制

靶向微管的抗肿瘤药物在临床上广泛应用，但这类药物多具有神经毒性、骨髓抑制等毒副作用，并容易产生耐药性，亟待发展新型的抗微管药物。我们课题组由文蛤体液中获得一种新的抗肿瘤蛋白MML， 前期的研究表明MML能够引起肿瘤细胞膜通透性增加，使肿瘤细胞阻滞于G2/M期，并明显抑制肿瘤细胞的微管蛋白聚合。进一步的研究发现MML与微管特异性结合，且该结合不受秋水仙素及长春花碱抑制，说明MML具有新颖的作用位点。本研究拟利用免疫共沉淀、免疫组化等技术研究MML与微管的相互作用；利用圆二色谱、荧光光谱等研究MML对微管蛋白空间结构和功能的影响；鉴定MML在微管蛋白上的结合位点，阐明新型结合位点对微管蛋白聚合解聚过程的影响规律，为开发新型的抗微管药物提供新的作用位点。

靶向微管的抗肿瘤药物在临床上广泛应用，但这类药物多具毒副作用，亟待发展新型的抗微管药物。我们课题组由文蛤体液中获得一种新的抗肿瘤蛋白MML，本研究发现MML在细胞水平上能够并明显抑制肿瘤细胞的微管蛋白聚合，在分子水平上能够抑制微管蛋白的聚合。利用圆二色谱、荧光光谱等研究MML对微管蛋白空间结构的影响，发现MML能够与微管蛋白相互作用，使微管蛋白的内源性色氨酸荧光发生淬灭，改变微管蛋白的疏水性，并明显改变微管蛋白的二级结构；MML与微管的相互作用能够使肿瘤细胞阻滞于G2/M期，破坏肿瘤细胞的线粒体膜电位，并通过内部凋亡通路，诱导肿瘤细胞的凋亡。对MML与微管蛋白结合位点的研究发现， MML与微管特异性结合，且该结合不受秋水仙素及长春花碱抑制，说明MML具有新颖的作用位点，但具体的作用位点需要进一步的研究。本研究阐明了新型抗肿瘤蛋白MML对微管的结构与功能的影响，揭示了MML抗肿瘤的作用靶点及机制，为开发新型的抗微管药物奠定了基础。通过本课题的实施，已经发表SCI论文6篇，核心期刊论文1篇；申请专利2项。