三维细胞外基质（ECM）和骨髓间充质干细胞（MSCs）组织工程化人工食管的比较研究及生物学评价

人工食管是食管切除后消化道重建的理想方式。细胞外基质（ECM）是制备人工食管良好的生物材料之一。研究表明：片状ECM不利于构建人工食管；食管细胞沿ECM移行生长能力有限，不能满足较长食管切除后的置换；单纯ECM人工食管不均衡的重塑可能是造成人工食管狭窄或破裂的主要原因。我们首次提出：以三维多层ECM为组织支架，以自体骨髓间充质干细胞（MSCs）为种子细胞，体外培养组织工程化人工食管并进行动物实验。本项目拟与单纯ECM人工食管相对照，比较研究组织工程化人工食管的体内生长过程。运用流式细胞和免疫组化技术，观察食管粘膜细胞与肌层细胞对食管重塑的影响。运用Brdu核标记和上皮细胞基因型检测技术，跟踪观察MSCs分化、生长和基因表达。运用MMPs的基因表达，动态观察ECM的体内降解过程。通过对此种全新的组织工程化人工食管的研究，揭示以ECM为组织支架的人工食管的重塑机制并做出必要和客观的生物学评价。

“三维细胞外基质（ECM)和骨髓间充质干细胞（MSCs)组织工程化人工食管的比较研究及生物学评价”项目于2010年获得国家自然科学基金会的资助，历经3年的实验研究，按计划已完成如下工作：1. 用地产白猪10头，从猪小肠制取天然管状ECM人工食管，并对其无菌处理方法进行了比较研究。2.已完成犬骨髓间充质干细胞的体外提纯、培养、扩增。3. 已完成骨髓间充质干细胞与ECM的复合培养并通过组织学，免疫学，流式细胞等方法，证明MSCs可以在ECM上生长并转化为上皮细胞和平滑肌细胞，完成组织工程化人工食管的制备。4. 在全麻下，进行了犬组织工程化人工食管移植的动物实验研究，动物存活时间未达到预期目的。发表相关论文三篇。