健脾补肾通络方刺激IL-17信号通路调控Th17细胞免疫应答“杂合”治疗进展型IgA肾病的机制研究

Progressive IgAN is a kind of immune-active renal disease and easily leads to ESRD. Due to the complex etiology and disease-bits,it is defined as "Zahe syndrome" in TCM theory.Jianpibushentongluo formulae has the comprehensive effects due to strengthening the body resistance to eliminate pathogenic factors.The results of previous, multicenter, randomized, double-blind clinical study confirmed that the Jianpibushentongluo formulae can effectively improve the patients’ renal function who suffered from the progressive IgAN.But the mechanism is unclear.Th17 cells can secrete IL-17 which induce the expression of CCL20 and its receptor CCR6,inducing kidney damage.Blocking effects on the IL-17 signal transduction and adjusting effects on immune-response could relieve hyperplasia and fibrosis in kindey tissue. .In this study, progressive IgAN rat model and Th17 cells will be used.The main experimental methods include pathology,cytobiology,immunology,molecular biology. This study will confirm the advantage of comprehensive therapy of Jianpibushentongluo formulae on the Progressive IgAN due to the adjustment of IL-17-controled Th17 immune-response,compared with traditional “single-target” therapy.The mechanism of the components will be observed.Exploring the mechanism will be helpful to provide experiment basis for clinical use.

进展型IgAN是一种免疫活跃、易导致患者进入终末期的肾病。其病因病机复杂多样，应属中医“杂合之证”。健脾补肾通络方能主次兼顾、扶正兼以祛邪，起到“杂合”治疗的作用。前期多中心、随机、双盲的临床研究已证实该方联合激素治疗能有效改善进展型IgAN患者的肾功能，但疗效机制尚不清楚。Th17细胞主要是通过分泌IL-17，诱导CCL20及其受体CCR6表达，引起肾组织损伤。刺激IL-17信号传导通路，调控Th17细胞的免疫应答，可有效缓解肾脏组织的增生及纤维化。.本研究将以进展型IgAN造模大鼠及Th17细胞为研究对象，运用病理、细胞生物学、免疫及分子生物学等方法。通过中药拆方研究，明确相较于中医传统“单一”治法、具有“杂合”作用的健脾补肾通络方在IL-17信号通路调控的Th17细胞免疫应答中参与治疗进展型IgAN的疗效优势，并了解方中各中药组分在该机制上的作用，为临床运用提供实验依据。

进展型IgA肾病是一种免疫活跃、易导致进入终末期的肾病。健脾补肾通络方能主次兼顾、扶正祛邪，起到“杂合”治疗的作用。前期临床研究已证实其参与治疗时能有效改善进展型IgA肾病患者的肾功能。本项目从体内、体外两方面开展研究，探索IL-17信号通路介导的Th17细胞免疫应答与肾脏损伤的相关性，以及健脾补肾通络方干预的有效性。并将本方拆方为健脾、补肾、调肝、通络四组，用于阐明具有“杂合”作用的健脾补肾通络方相较于“单一”中医治法的疗效优势。开展了生化，病理，流式细胞术（Th17细胞），免疫组化，Western blot，real-time PCR等多项实验。在体内研究中，利用Lewis大鼠进行进展型IgA肾病造模。在体外研究中，运用Th17细胞的最主要效应因子IL-17进行刺激大鼠肾小球系膜细胞，模拟Th17细胞对于肾脏的影响。予以不同中药和（或）激素进行干预。结果发现：1.进展型IgA肾病造模大鼠肾脏损伤与IL-17信号通路介导的CCL20/CCR6应答Th17细胞免疫过程具有一定的相关性。2.中药健脾补肾通络方联合激素能通过影响此免疫反应一定程度上缓解进展型IgA肾病大鼠的肾脏病变，且相较于单纯激素治疗具有一定的疗效优势。3.IL-17可作为一种炎症介质刺激大鼠肾小球系膜细胞的增殖并产生CCL20。中药健脾补肾通络方联合激素能有效抑制IL-17刺激后大鼠系膜细胞的增殖，并降低CCL20的表达。4.相较于中医“单一”疗法，具有“杂合”功效的健脾补肾通络方能更有效地改善进展型IgA肾病大鼠的肾脏损伤，降低系膜细胞的增殖。在影响IL-17信号通路介导的CCL20及CCR6应答Th17细胞的免疫过程中，相较于健脾补肾通络方中的其他药物组分，具有活血化瘀通络功效药物组分对其作用最强。研究结果可为临床运用中药健脾补肾通络方“杂合”治疗进展型IgA肾病提供实验依据。