利用RNA干涉技术研究新型酸感受离子通道

酸感受离子通道（ASIC）为H＋门控性阳离子通道，在体内与H＋共同参与了对中枢和外周神经元突触传递及其可塑性的调节，可望成为改善学习记忆、镇痛、抗癫痫和神经元保护药物的新靶标。最近我们发现大鼠海马神经元表达了两种不同特征的新型ASIC。已知海马内存在ASIC的3个亚基ASIC1a，ASIC2a和ASIC2b的mRNA，但ASIC的组成及各亚基的功能却不清楚。本课题拟采用近年新发展的RNA干涉技术，在培养的新生大鼠海马神经元上，通过转染特异性小干涉RNA，分别抑制ASIC三种亚基的单一或联合表达，利用膜片钳技术观确定某亚基表达被封闭后ASIC的功能性表达，观察干涉后ASIC的H＋敏感性、动力学和药理学特征的改变，以便阐明ASIC分子结构与其生物学功能的关系，并探索创建以RNA干涉和膜片钳技术为支撑的技术平台，为受体、离子通道等生物大分子结构与功能关系的研究提供新的手段。