miR-553和miR-let-7c对精原细胞分化的调控机制及其参与弱精子症发病机制的研究

It has been reported that the infertility caused by male factor has risen to 50%. Among them, the asthenospermia consists of one of the most important factor. However, the mechanism of asthenospermia is unclear and we still lack effective treatment on patients. Therefore, a novel manner for treatments of the asthenospermia is a major scientific issue for reproductive health research. In recent years, the small molecule RNA in spermatozoa attracts researcher attentions, especially miRNA and piRNA, which may play important roles in regulation of spermatogenesis. In our study, we intend to verify the functions of miR-553 and miR-let-7c on their target genes and related proteins by detecting the status of methylation in CpG islands of miR-553 and miR-let-7c in pateints with asthenospermia in Guangxi, which will provide new insights and experimental basis for early diagnosis and treatment in asthenospermia.

据统计，由男方因素导致的不孕不育已上升到了50%，而弱精子症作为导致男性不育的重要因素，发病机制不明确，尚且缺乏有效的治疗。因此，寻找新的治疗方法提高弱精子症患者的治疗效果将是生殖健康研究中一个亟待解决的重大科学问题。近年来,精子内小分子 RNA的研究已经引起学者们的广泛关注，特别是 miRNA 和 piRNA ，可能对生殖细胞发育和精子发生起重要的调控作用。本项目拟选择广西地区弱精子症患者中异常高甲基化的miR-553和miR-let-7c进行深入研究，通过检测弱精子症患者精子中miR-553和miR-let-7c基因甲基化状态、基因表达及其靶基因表达水平, 从精子发生过程验证miR-553和miR-let-7c通过基因启动子区CpG岛甲基化状态的改变作用于靶基因，从而参与了精原细胞分化与调控的机理。这将为弱精子症患者的早期诊断及治疗提供新的靶点和实验依据。

据统计，由男方因素导致的不孕不育已上升到了50%，而弱精子症是临床上导致男性不育最常见的原因之一。目前，弱精子症对男性生殖健康的危害得到了广泛的重视，但其发病机制有待深入的探讨。近年来,精子内小分子RNA的研究已经引起学者们的广泛关注，特别是miRNA和piRNA，可能对生殖细胞发育和精子发生起重要的调控作用。本课题研究中，我们拟选择广西地区弱精子症患者中异常表达的miR-let-7c进行深入研究：构建miR-let-7c过表达和沉默表达慢病毒载体，转染小鼠GC-1spg细胞，探索miR-let-7c对GC-1spg细胞的增殖的影响，分析miR-let-7c参与精子发生的调控机理；检测临床弱精子症和正常患者的精子的miR-let-7c表达水平，探索miR-let-7c与弱精子症的相关性；利用CRISPR/cas9基因编辑技术，构建miR-let-7c基因敲除小鼠模型，探索miR-let-7c对雄性小鼠生育力的影响及其分子机制。我们的研究结果初步探究了miR-let-7c在精子发生过程中的调控机制，并为弱精子症患者的早期诊断及治疗提供新的靶点和实验依据。