自由基与ACE-AngⅡ-AT1R轴 /ACE2-Ang(1-7)-Mas轴在肝纤维化发生中的相关性：肝纤维化防治的新靶点

HSC的早期活化是肝纤维化发生的中心环节，自由基及RAAS对此均起着关键作用，但两者在该过程中的调控机制尚不明确。本研究在"治未病"思想指导下，以自由基与ACE-AngⅡ-AT1R轴/ACE2-Ang(1-7)-Mas轴的相关性为切入点，采用MD-ESR联用及蛋白芯片等技术，通过观察Fenton等体外氧化反应体系致HSC-LX2氧化应激以及四氯化碳复合法等造模方法致Wistar肝纤维化过程中，诸因素对ROS-（ACE-AngⅡ-AT1R/ACE2-Ang(1-7)-Mas）通路的影响及鳖甲煎口服液的干预作用，以揭示ROS-（ACE-AngⅡ-AT1R/ACE2-Ang(1-7)-Mas）通路在肝纤维化不同阶段的信号转导机制，为明确自由基在肝纤维化发生中的损伤机制提供借鉴，并深入探索鳖甲煎口服液防治肝纤维化的作用机理，藉此寻找早期防治肝纤维化的潜在作用靶点（群），为肝纤维化的防治提供新思路。

自由基在HSC的早期活化起着关键作用，但与RAAS在肝纤维化形成中的相关性尚不明确。本研究在“治未病”思想指导下，以自由基与ACE-AngⅡ-AT1R/ACE2-Ang(1-7)-Mas的相关性为切入点，采用MD-ESR联用及蛋白芯片等技术，通过观察不同诱导剂致HSC-LX2氧化应激及多种造模法致Wistar大鼠肝纤维化过程中对ROS-（ACE-AngⅡ-AT1R/ACE2-Ang(1-7)-Mas）通路的影响及鳖甲煎口服液（BOL）的干预作用，以揭示ROS-（ACE-AngⅡ-AT1R/ACE2-Ang(1-7)-Mas）通路在肝纤维化不同阶段的病理机制，寻找早期防治肝纤维化的潜在作用靶点（群），并深入探索BOL防治肝纤维化的作用机理。研究显示：AngⅡ诱导HSC-LX2氧化应激时可产生两种自由基——羟自由基和单线态氧自由基；不同时间应用BOL均可有效抑制AngⅡ诱导HSC-LX2氧化应激时产生的羟自由基，但对单线态氧自由基效果较弱；BOL可抑制细胞氧自由基的产生，拮抗ACE-AngⅡ-AT1R轴的作用；同时，增强ACE2-Ang(1-7)-Mas的作用，此过程涉及抑制JAK-STAT通路、TGFβ-Smad通路、MAPK通路、NF-κB通路的活化，激活Ang(1-7)水平进而抑制AngⅡ产生ROS的水平，藉此对抗肝纤维化的发生与发展。CCl4诱导大鼠肝纤维化时可发生氧化应激并产生自由基，BOL对其有很好的清除作用；在大鼠肝纤维化进展过程中，肝脏RAAS能被激活，表达增高，ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴对肝纤维化起保护作用。BOL能够通过影响大鼠RAAS来发挥抗肝纤维化的作用。影响Wnt通路可能是BOL产生抗纤维化作用的机制之一。异种血清诱导大鼠肝纤维化时伴有氧化应激并产生烷基自由基，BOL对其有很好的清除作用。在此过程中，肝脏局部RAAS被激活，各成分表达增高，ACE- AngⅡ-AT1R轴促进肝纤维化的发展，ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴对肝纤维化起保护作用。BOL能够通过影响大鼠RAAS，来发挥抗肝纤维化的作用。调节PPAR-γ、NF-κB、Nrf2通路可能是BOL产生抗纤维化作用的机制之一。综合以上结果，我们通过细胞、整体动物实验发现了多种因素诱导肝纤维化早期产生的自由基，由于技术手段的局限，自由基的确切类型仍难以确定。自由基致肝纤维化进程