一氧化碳释放分子对脓毒症血小板活化关键信号分子HS1磷酸化及其调节激酶的干预与分子机制

脓毒症时血小板主要的膜糖蛋白受体PARs、GPVI等在血小板的过度活化和系列信号转导,血小板聚集等病理过程中起着极其重要的作用，但其密切相关的下游关键信号分子HS1磷酸化及与其调节激酶的关系目前尚未阐明。本研究采用CLP脓毒症动物模型和相关血小板模型，以新型一氧化碳释放分子提供外源性CO进行干预，运用基因分析、蛋白质水平测定等手段，在分子、细胞和整体等不同层面上，研究脓毒症血小板重要膜糖蛋白受体及其下游关键信号分子HS1的磷酸化以及调节激酶（Syk，Lyn等）的系列变化，尤其是相应激酶活性变化对HS1磷酸化的动态调控，旨在探明脓毒症时血小板信号分子顺序活化与调节激酶之间的相关关系，发现或探明HS1磷酸化及重要调节激酶是否是外源性CO的最佳作用对象及机制，以明确CO调节脓毒症时异常血小板活化及信号传导的（部分）分子学基础，进一步发现脓毒症干预的新靶位，为临床脓毒症的治疗提供新思路。

脓毒症是严重创伤、休克及感染后常见的并发症,脓毒症时由于细胞因子瀑布样释放,激活凝血系统,同时纤溶系统及生理性的抗凝系统受到不同程度的抑制,血液处于高凝状态,微血管内微血栓广泛形成,微循环障碍，进一步发展可导致脓毒性休克、MODS。本研究在脓毒症动物模型和人血小板细胞模型上，外源性一氧化碳释放分子(CORM-2)进行干预,揭示了CORM-2基于对HS1信号通路活化的抑制而抑制了脓毒症时血小板以及凝血系统过度活化。结果表明:（1）CORM-2对血小板膜糖蛋白表达(CD61和CD62p)及血小板活化(粘附和聚集功能)具有明显的抑制作用。（2）CORM-2明显降低脓毒症时凝血因子FIB、D-D、TF的表达，同时增加组织因子途径抑制物TFPI水平，从而下调血小板粘附和聚集功能，最终抑制了脓毒症凝血系统的过度活化；CORM-２明显抑制了脓毒症血小板HS1和GSK-3β的表达及其磷酸化水平。(3) CORM-2对脓毒症时血小板HS1磷酸化调节激酶Syk、Lyn活性具有明显抑制作用, 这可能是凝血系统过度活化被抑制的重要机制之一。(4)CORM-2通过对心肌细胞线粒体能量代谢的调节作用从而保护脓毒症时心脏功能。本课题初步阐明了CORM-2对脓毒症时血小板和凝血系统过度活化的抑制作用，为临床脓毒症治疗提供了新思路。