RNF8转录后调控ERa的机制及其在ERa阳性乳腺癌中的作用

Breast cancer is one of the most common malignancies in women around the world. Estrogen Receptor α (ERα) is highly expressed in most breast cancer. ERα signaling pathway plays an important role in the development and progression of breast cancer. We found that RNF8,as an associated partner of ERα,could stabilize ERa,co-activates ERα-mediated transactivation and trigger ERα monoubiquitination . The lack of RNF8 significantly inhibited the proliferation of breast cancer . In this study, we are aiming at illuminating the underlying mechanism of the regulation of ERα-mediated transactivation by RNF8 and its role in breast cancer development and progression in cells，model animals and clinical samples. It is expected to provide theoretical basis and new treatment target for breast cancer.

乳腺癌是全世界女性高发的恶性肿瘤之一，雌激素受体α（Estrogen Receptor α，ERα）在大多数乳腺癌中呈现高表达， ERα信号通路在乳腺癌发生发展各阶段均发挥重要的作用。我们在前期工作中发现RNF8可作为ERα辅调节因子显著上调ERα介导的基因转录，并对ERα进行单泛素化作用。 RNF8的缺失明显抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖能力。本项目旨在从分子细胞、动物模型和临床样本多角度阐明RNF8调控ERα介导基因转录的相关分子机制，分析其在ERα阳性乳腺癌发生发展中的作用，可望为治疗乳腺癌提供理论依据和新靶点。

雌激素受体a (Estrogen receptor alpha, ERa)是核受体超家族成员之一，是配体依赖的转录因子。在配体(雌激素)的刺激下，ERa进入细胞核内与基础转录复合物、辅调节因子等相互作用，共同调节下游靶基因的转录，发挥相应的生物学功能。乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，ERa在超过60%乳腺癌中被检测出呈高表达，其在乳腺癌的发生、发展等过程中发挥极其重要的作用。因此，鉴定和解析ERa辅调节因子在ERa介导基因转录中的调控机制及在乳腺癌治疗中的作用越来越受到关注。. 在本项目的资助下，我们首先通过confocal 和co- IP的方法证实了RNF8与ERa在哺乳动物细胞内共定位并存在相互作用。接着，利用荧光素酶双报告基因系统，我们发现RNF8能够上调ERa介导的转录激活作用。我们利用realtime PCR和WB的方法进一步证实了在乳腺癌细胞系中，RNF8能够上调一系列ERa靶基因的表达。进一步地，我们证实RNF8 能够单泛素修饰ERa并增强ERa蛋白稳定性。为了明确RNF8在乳腺癌细胞中的生物学功能，我们研究了RNF8对乳腺癌细胞生长和细胞周期的影响，结果表明，敲低RNF8能够抑制乳腺癌细胞的增殖能力，并使乳腺癌细胞的细胞周期进程发生阻滞，并且这种影响与ERa具有相关性。最后，我们对RNF8在乳腺癌组织中的表达情况进行了研究，证实RNF8在乳腺癌中呈现高表达，而且与ERa表达水平存在明显正相关性。. 综上所述，我们证实了RNF8上调ERa介导的转录激活作用，且进一步明确了RNF8在体内体外对乳腺癌生长的促进作用。这些结果丰富了乳腺癌中对ERa信号通路的调控机制，为乳腺癌的临床诊断和靶向治疗提供新的实验依据和思路。