基于TRPV1通道探讨缩泉丸对膀胱过度活动症的作用机制

"Suo Quanwan", as a representative prescription of TCM therapy "nourishing kidney and reducing urination", has significant effect on clinical treatment of Overactive Bladder(OAB), but the mechanism remains unclear. Researches about OAB always focus on functions of destrusor as well as nerve receptors, whether the connection of cells and signaling transmission normal or not,etc. Nevertheless, bladder sensory afferent activities be paid little attention. As a member of transient receptor potential family, TRPV1 is a pressure sensor in the bladder, mediating stretch detection. What's more, TRPV1 can also regulate urinary bladder contractions and function of afferent nerve. It plays a crucial role in maintaining bladder physiological function stability. We found that SQW can adjust bladder detrusor relaxation and improve HPA axis function. Therefore, Our research group plans to further discuss the treatment mechanism of SQW to Overactivity Bladder. TRPV1 which mediate bladder sensory afferent will the breakthrough point. Researching set about from expression of TRPV1 and its signal transduction pathway. We aim to clarify acting targets and pathway of SQW to OAB,and tnen clear the mechanism that SQW can interfere TRPV1 expression of OAB.

以缩泉丸为代表的中医补肾缩尿法在膀胱过度活动症(OAB)的治疗中取得了广泛而可靠的疗效，但缩泉丸干预OAB的具体作用机制尚未十分明确。既往对OAB的研究注重于膀胱逼尿肌及其神经受体功能异常、细胞间连接及信号传递异常等，而对膀胱感觉传入活动的异常有所忽视。瞬时受体电位通道家簇中的TRPV1作为膀胱的压力感受器，维持着膀胱正常排尿功能的机械感觉，同时TRPV1能够调节膀胱的收缩与传入神经的功能，在维护膀胱功能的稳定中具有非常重要的作用。我们前期研究发现，缩泉丸可以调节膀胱逼尿肌舒张功能并且能改善HPA轴功能，因此，我们拟使用缩泉丸对膀胱过度活动症做进一步研究，拟研究调节介导膀胱感觉传入功能的TRPV1的表达及信号转导通路来分析缩泉丸对膀胱过度活动症TRPV1通道的调节作用，初步阐明缩泉丸治疗膀胱过度活动症的具体作用靶点和作用途径，从而明确缩泉丸干预膀胱过度活动症中TRPV1表达的机制。

正常的膀胱感觉功能有赖于神经系统、膀胱逼尿肌和尿道括约的协调，研究发现TRPV1在维持膀胱正常排尿功能的机械感觉中起重要作用。本课题将通过观察缩泉丸对TRPV1表达及信号传导的作用，观察其对膀胱感觉功能及运动功能的影响，深入诠释和阐明缩泉丸治疗OAB的药理学作用及机制，为完善缩泉丸改善膀胱功能的作用机制提供科学依据。..研究从OAB模型动物及TRPV1基因敲除动物着手，建立大鼠OAB模型、通过观察OAB模型大鼠膀胱TRPV1的分布及表达、TRPV1-/-小鼠膀胱功能的变化，以验证TRPV1在膀胱功能中的作用；而后通过观察缩泉丸对OAB模型大鼠排尿活动及尿动力学参数的变化、对TRPV1在膀胱表达的变化、对大鼠神经传入电活动的改变、对膀胱上皮细胞的形态、UPII表达、Ca2+的释放和TRPV1和P2X3表达；并利用TRPV1-/-小鼠探讨缩泉丸对TRPV1信号通路的调控。多层次深入揭示缩泉丸基于TRPV1治疗OAB的作用机制。..研究结果：.1． 确立OAB大鼠模型复制条件：尿动力学检测结果显示， 4周模型组的BLPP、MVP、MBC、RV、NVC与相应的假手术对照组比较明显升高，模型6周后可能进入失代偿期。因此应选择4周前的模型。.2． TRPV1参与了膀胱的运动功能及感觉功能：OAB大鼠膀胱TRPV1的分布及其mRNA、蛋白表达显著升高； TRPV1-/-小鼠出现膀胱功能障碍，盆神经放电减弱。.3． 缩泉丸可能通过改善逼尿肌功能及神经感觉功能而治疗OAB，该机制可能与其调节TRPV1在膀胱的表达有关： 缩泉丸能稳定膀胱逼尿肌，改善膀胱功能、能使OAB模型大鼠膀胱内TRPV1的分布与表达明显减少，降低盆神经的放电冲动，可减轻模型动物对CAP灌注所引起的效应。缩泉丸对OAB大鼠膀胱上皮细胞的形态、UPII表达有改善作用、减少Ca2+的释放和TRPV1和P2X3表达。.4 缩泉丸对TRPV1信号通路的调控：TRPV1-/-小鼠逼尿肌条ATP释放量明显下降，改善膀胱逼尿肌功能。.结论：.缩泉丸可明显改善OAB大鼠膀胱的运动功能及感觉功能，该作用与其调控OAB大鼠膀胱内TRPV1的表达有关，其机制可能是通过降低膀胱内TRPV1受体的表达及通过TRPV1信号通路调节神经递质（如ATP）释放及P2X3的表达，从而改善膀胱充盈过程中逼尿肌的不稳定收缩，改善OAB症状。