中性粒细胞致胆囊Cajal样间质细胞损伤的形态与功能研究

课题组首次发现胆囊存在Cajal间质细胞（interstitial cells of Cajal, ICC）。随后我们研究显示，胆囊ICC上存在胆囊收缩素A型受体(CCK-AR)；破坏ICC后胆囊平滑肌收缩减弱；同时其对胆囊收缩素（CCK）的敏感性降低，提示CCK通过ICC上CCK-AR引起平滑肌的收缩。我们新近发现：在急性胆囊炎模型中，中性粒细胞与ICC之间存在突触联系，提示中性粒细胞可能通过ICC引起胆囊动力异常，这解释了急性胆囊炎存在动力异常的现象。为此，为了进一步研究中性粒细胞致ICC损伤的机制，本课题拟从下述层面继续开展研究：①中性粒细胞和炎症状态下的中性粒细胞对胆囊ICC的形态与功能影响；②明确此种作用与何种炎症介质相关，并研究其对ICC的作用机制。这拓宽了ICC的功能认识，有助于部分阐明急性胆囊炎中胆囊动力异常的机制，为临床炎症相关性动力障碍性疾病的防治提供新思路和理论依据。

研究目的：探讨中性粒细胞对胆囊 ICCs 形态和功能损伤过程机制， 为胆囊动力性疾病发病机制和治疗的研究提供新的思路和方法。.研究内容:（1）分离并培养正常胆囊ICC细胞，与正常豚鼠外周血中性粒细胞共培养，观察中性粒细胞致ICC细胞损伤的形态改变；（2）构建急性胆囊炎豚鼠模型，提.取炎症激活状态下的中性粒细胞；将此中性粒细胞与正常的胆囊ICC细胞共培养，观察炎症下中性粒细胞致ICC细胞损伤的形态改变；（3）构建急性胆囊炎豚鼠模型和“急性胆囊炎+抗中性粒细胞单克隆抗体干预模型”，比较二者胆囊组织炎症、ICC形态和功能的改变情况。.重要结果：（1）成功分离和培养正常胆囊ICC细胞，并成功构建急性胆囊炎豚鼠模型；（2）炎症下中性粒细胞对正常ICC细胞有明显损伤；（3）模型豚鼠经抗中性粒细胞抗体作用后，外周血液发生改变，胆囊组织炎性浸润减少，对正常ICC细胞有恢复作用。.关键数据：（1）HE染色显示，胆道梗阻的时间越长，胆囊炎症逐渐加强；（2）Western bloting、PCR、IF、IHC、Tunel、透射电镜等检测，均提示中性粒细胞对正常胆囊ICC细胞的形态和数量有一定的影响；（3）模型豚鼠经抗中性粒细胞抗体作用后，Western bloting、PCR等检测，提示抗中性粒抗体对ICC的损伤有恢复作用。.科学意义：阐明急性胆囊炎中胆囊动力异常的机制，为临床炎症相关性动力障碍性疾病的防治提供新的思路和理论支撑。