miR-196a对胰腺癌转移的预测及其机制研究

在多种恶性肿瘤中，microRNA作为重要的基因标志物已经显现出潜在的诊断价值，目前已经发现miR-21，155，221等可能与胰腺导管腺癌的发生呈正相关，而miR-196a的高表达提示预后差。本研究拟在前期研究基础上，通过已建立的血清胰腺癌特异性miRNA检测技术，以miR-21为参照，建立血清检测miR-196a的实时定量PCR方法并评价其对胰腺癌转移的预测价值。同时在淋巴结转移胰腺癌标本中，采用显微切割、原位PCR等技术检测miR-196a的表达状况及其调控靶分子HOX家族、Annexin A1、PTCH1的表达，并构建包含TNFSF12、SLC9A6等基因的GFP报告载体对预测的新靶分子进行验证。进一步采用特异性寡聚核苷酸干扰miR-196a高表达胰腺癌细胞株的miRNA表达，观察其对裸鼠移植瘤生物学行为和转移的影响，为进一步研究miRNA在胰腺癌转移过程中的机制奠定实验基础。

本研究从血清miR-196a及其他miRNA分子对胰腺癌的诊断、鉴别诊断和预后判断的价值入手，通过一系列体内和体外的实验研究，初步阐明了miR-196a在胰腺癌发生和转移中的作用，并发现了一系列下游靶基因的调控位点，为深入研究胰腺癌的发生和转移机制奠定了基础。主要创新点体现在以下4个方面：.1. 发现3种血清miRNA分子（miR-21、miR-155、miR-196a）可用于胰腺癌诊断，并发现miR-196a对胰腺癌预后有预测价值。.2. 首次报道血清miR-16和miR-196a联合检测可将CA19-9对早期胰腺癌（临床I期）诊断敏感性由55.6%提高至85.2%。.3. miR-196a与胰腺癌细胞凋亡、增殖、侵袭能力密切相关：高表达miR-196a可以促进胰腺癌细胞增殖，并可以提高其侵袭能力；低表达miR-196a可以促进细胞凋亡；miR-196a可以调控肿瘤细胞侵袭能力。.4. miR-196a可通过靶基因ING5表达的调控影响胰腺癌的生物学行为，其他调控通路还包括SOX11、SSR1、HAND1和ARHGAP28等基因。.本项目初步阐明了miR-196a影响胰腺癌患者预后的机制，为其转化为临床上胰腺癌患者病情评估及治疗的分子靶标提供了重要的理论依据。研究期间共发表SCI论著3篇（均已标注基金资助），中文论文5篇（2篇论著，3篇综述），获上海市科技进步一等奖和上海医学科技一等奖各1项，申请国家发明专利2项（实质性审查中），培养博士研究生3名（毕业2名，在读1名）。下一步拟对miR-196a靶分子调控机制开展进一步研究。