基于UPR信号通路探讨针刺对EAE模型小鼠的神经保护作用

Multiple Sclerosis is one of the most common chronic neural degeneration diseases in adult human，many clinical results show that acupuncture has obvious effect on treatment of facial paralysis，however，the study of regulation of UPR pathways by acupuncture in neuroprotection is limited. Base on previous study, manipulation of UPR pathways protect neurodegeneration in EAE mouse. We hypothesized that acupuncture inhibited inflammation and regulated UPR pathway in RGC. We will create mouse Multiple Sclerosis model-EAE model, treat EAE mouse with acupuncture at Fengchi acupoint，then examine the expression level of CHOP and XBP1s and phosphorylation level of eIF2α，which are the key molecules of UPR pathway in RGC， we also examine microglia marker-Iba1 and T cell marker-CD3 to test the inflammation level in optic nerve，and finally assessed the protection effect toward RGC survival. This study will reveal the mechanism of acupuncture treatment in inflammation inhibition and protection of neurodegeneration, providing scientific basis for clinical therapy of Multiple Sclerosis.

多发性硬化症是成年人最常见的慢性神经系统退行性疾病，大量临床结果显示针刺对治疗面瘫有显著疗效果，而针刺对神经保护密切相关的UPR信号通路的调节方面的研究完全空白。基于先前的研究成果，调节UPR信号通路能够保护EAE模型小鼠RGC神经元的退行性病变。我们提出假说，针刺能够抑制炎症反应并调节RGC神经元UPR信号通路，保护EAE模型小鼠视神经和RGC神经元的退行性病变。我们通过建立多发性硬化症的小鼠模型-EAE模型，针刺风池穴治疗视神经炎，检测RGC神经元UPR信号通路的关键蛋白分子CHOP和XBP1s的表达变化以及eIF2α的磷酸化水平变化，以及视神经中小胶质细胞标记物Iba1和T细胞标记物CD3的变化，观察统计对RGC神经元的保护作用，阐释针刺抑制炎症反应和保护神经元退行性病变的作用机理，为针刺临床治疗多发性硬化症提供科学依据。

中医临床上经常用针灸治疗神经损伤，为了研究针灸治疗神经损伤背后的机制，我们通过建立急性视神经损伤小鼠模型以及慢性视神经炎症小鼠模型，通过针刺 GB20穴位进行治疗，对照组用针刺GV16穴位作为对照，利用RNA sequencing的方法检测治疗后小鼠视网膜转录组的基因mRNA表达变化，发现针刺 GB20穴位能够调节大量视网膜基因表达，其中包括一系列重要的转录调节因子。随后我们还证明风池穴的治疗处理能够增加神经损伤后视网膜视神经细胞（RGC）的存活率。该研究结果以通讯作者发表多篇SCI论文。我们同时还研究针刺治疗肌肉损伤的机理，通过建立腓肠肌肌肉损伤模型，经过阿是穴的单一位点针刺处理，结合病理切片染色和RNA sequencing分析，发现单一位点针刺肌肉处理显著促进了损伤肌肉的再生修复，该研究结果也以通讯作者发表在 SCI 杂志上。..在看到了传统的中医针灸对神经损伤都有奇效，我们接下来研究中医的宝库中草药对神经损伤的治疗效果，通过往视神经损伤的小鼠眼球中分别注射各种枳实单体，发现枳实中的柚皮素单体对视网膜神经元有显著保护效果，同时研究发现该神经保护作用是通过抑制 JNK-JUN 信号通路实现的，该研究成果发表在了 JCR Q1类顶刊上，影响因子高达5.9...综上所述，我们从中医传统的针灸以及中草药中都找到了治疗视神经损伤的关键穴位以及关键中草药单体，对后续视神经损伤的临床病人的治疗有重大的借鉴意义，有望在临床治疗中得到推广。