登革病毒抗体依赖增强感染诱导的APC自噬对T细胞免疫谱系影响在重症登革病理机制中的作用研究

Antibody dependent enhancement (ADE) of dengue virus (DENV) infection is identified as the main risk factor of severe Dengue diseases. Through opsonization by subneutralizing or non-neutralizing antibodies, DENV infection suppresses innate cell immunity to facilitate viral replication. Our previous study demonstrated that DENV-ADE infection of monocytes could induce autophagy formation，the early induced autophagic proteins ATG5-ATG12 participate in suppression of RLR-MAVS signalling axis. However, the protective role autophagy inhibitor in DENV-ADE model did not readily rely on suppression of virus production. In consideration of the potential role of autophagy in MHC depended.antigen presentation, it would be reasonable to postulate that the induction of autophagy in DENV-ADE infected monocytes may participate in the pathogenesis of severe dengue disease. In this study, we will Integrated analysis the autophagic effects on lineage differentiation and immune repertoire of CD4+ T/CD8+ T subsets in the ADE condition. Further investigation of the role of autophagy in severe dengue disease will help to add knowledge about the complexity of ADE infection and contribute further to research on therapeutic strategies.

登革病毒抗体依赖增强感染是重症登革热疾病主要风险因素之一。研究显示，亚中和/非中和滴度抗体调理吞噬介导的病毒感染能够抑制细胞固有免疫途径从而促进病毒增殖。我们前期研究表明，抗体依赖增强感染单核细胞能够特异上调细胞自噬途径，进而抑制RIG-I/MDA-5介导的抗病毒固有免疫。然而免疫健全小鼠抗体依赖增强感染模型显示，抑制自噬的病理保护作用并不取决于降低的病毒血症。结合自噬在外源性抗原提呈中的潜在作用，我们推测靶细胞中增强的自噬反应亦可能通过调节适应性免疫反应促进重症登革病理发生。本研究中，我们拟整合分析DENV-ADE动物模型中自噬对T细胞功能和谱系分化，CD4+ /CD8+ T细胞免疫谱系组成和免疫显性表位的转变的影响，从适应性免疫角度深入探讨自噬在重症登革病理发生中的作用机制。本研究将有助于加深对重症登革病理机制理解，为疾病防治提供潜在靶点。

抗体依赖增强感染（ADE）是重症登革热疾病主要风险因素之一。DENV-ADE体外感染模型已表明“抗原-抗体”免疫复合物感染的单核细胞能够特异性上调自噬进程，通过抑制RIG-I/MDA5-MAVs-p65/IRF1-ISGs固有免疫途径，从而促进病毒在靶细胞中的复制。然而，目前对自噬在体内模型中的病毒复制调控及抗病毒免疫反应调节机制尚不清楚。本研究中我们首次构建了免疫健全小鼠的DENV-ADE模型，Bal/c小鼠模型母婴过继抗体依赖增强感染模型能够体现出重症登革病毒病（DHF/DSS ）特有出血病理现象及高病毒载量，并且通过自噬促进剂和抑制剂证明细胞抑制细胞自噬能够显著降低重症登革病理发生，并显著促进子代攻毒小鼠的存活。单核/巨噬细胞特异的ATG5敲除显著抑制了ADE感染中病毒在多种脏器中的复制以及肝脏与脑部炎性细胞浸润；同时多个覆盖病毒结构蛋白与非结构蛋白的MHCI表位反应性分析显示，ADE感染所激活的病毒特异性T细胞类群显著不同于直接感染模式，且A129（一型干扰素缺陷鼠）的攻毒模型进一步确认单核/巨噬细胞条件性自噬敲除并不会显著减低T细胞抗病毒能力。我们的研究表明，登革病毒ADE感染中抑制自噬能够有效降低病毒体内复制并缓解病理表型，同时特异性抑制抗原提呈细胞的自噬作用尽管会一定程度改变病毒特异T淋巴细胞谱系形成，但并不会削弱其抗病毒效应。该研究结果提示，抑制自噬可能是一种极具潜力的重症登革治疗药物，其可能通过限制病毒复制缓解疾病症状。