三疣梭子蟹精子入卵机制的研究

申请者已经发现，三疣梭子蟹精子通过顶体反应入卵膜后，卵质膜受激定向形成锥状突起，该锥状突起拖精穿越卵周隙和入卵质膜。在此基础上，采用电镜技术和激光共焦扫描镜技术进一步观察精子入卵的细胞学全过程；采用细胞松弛素B和秋水仙素处理的方法，利用组织切片和免疫细胞化学技术阐明卵子细胞骨架在精子入卵中的作用；采用激光共焦扫描镜技术检测卵水诱导顶体反应过程中精子质膜内、外钙离子和pH的变化；采用离心、柱层析和电泳等生化分离技术和功能分析方法筛选、确定在精子着卵、卵水诱导精子顶体反应和卵质膜锥状突起形成等过程中起关键作用的生化组分，进而阐明三疣梭子蟹精子入卵的机制。本项目的开展不仅在进一步丰富甲壳动物发育生物学理论、促进学科发展方面具有重要的理论意义，而且将为三疣梭子蟹杂交育种、雌核发育及精子载体法转基因等遗传改良技术的研究、建立提供理论指导。