生防假单胞杆菌Ⅲ型分泌系统组成基因的克隆与超微结构鉴定

细菌的Ⅲ型分泌系统被认为是革兰氏阴性病原菌特有的致病系统,负责毒性因子的输出。但是最近在植物病害生防假单胞杆菌2P24中也发现了Ⅲ型分泌系统，并克隆了12个同源基因，其组成和分布与致病菌丁香假单胞非常相似。本项目拟利用pLAFR5黏粒载体构建2P24菌株的基因组文库，根据现有基因序列设计探针，克隆Ⅲ型分泌系统整套组成基因(约25个，30kb)，并进行序列分析和基因注释；利用蔗糖梯度离心分离Ⅲ型分泌系统的超分子复合体，并通过透射式电子显微镜观察其超微结构；分别定位敲除hrcC、hrcR和hrpA基因并进行功能互补，探讨这些基因在Ⅲ型分泌系统超分子复合体形成过程中的作用。本项目的实施不但可以丰富对"非病原菌Ⅲ型分泌系统组成与结构"的科学认识，同时也将为研究该系统在生防细菌中的功能奠定理论基础。