新型载MCP1-siRNA纳米粒复合体造影剂的制备及抑制动脉粥样硬化的实验研究

MCP-1可作为动脉粥样硬化疾病基因治疗领域的一个理想侯选基因,如何安全、高效地实现目的基因的定向转染是基因治疗的关键。本研究设想在前期成功制备"脂氟显"超声造影剂的基础上，以脂质纳米微粒作为RNA干扰的载体系统，采用"生物素－亲和素"桥连法与脂质微泡耦连，制备耦连载MCP1-siRNA纳米微粒的新型造影剂，并优选其制备工艺，得到一种既有较高载基因量及转染率，又能在超声场中靶向释放基因的新型超声造影剂；同时将其经外周静脉注入腹主动脉损伤模型兔体内，通过体表超声辐照，诱导微泡空化破裂，靶向释放基因，增强局部转染效果，进而观察MCP-1基因沉默对动脉粥样硬化发生及发展的影响，探讨一种抑制动脉粥样硬化疾病的基因治疗新方法，同时为超声联合造影剂介导的基因治疗提供新的思路。

本研究在前期成功制备"脂氟显"超声造影剂的基础上，成功制备出载基因脂质纳米微粒并以之作为作为RNA干扰的载体系统，采用"生物素－亲和素"桥连法与脂质微泡耦连，制备耦连载MCP1-siRNA纳米微粒的新型造影剂。优选其制备工艺，得到一种既有较高载基因量及转染率，又能在超声场中靶向释放基因的新型超声造影剂。体外实验结果表明，在优化的参数设置条件下，该造影剂可将携带的基因稳定转染内皮细胞，并且保证内皮细胞在超声辐照下具有较小的凋亡率。将该新型超声造影剂经外周静脉注入腹主动脉损伤模型兔体内，通过体表超声辐照，诱导微泡空化破裂，靶向释放基因，增强局部转染效果，结果证实，该方法可有效抑制腹主动脉内皮表达MCP-1，进而在一定程度上延缓动脉粥样硬化的发生及发展，探讨了一种抑制动脉粥样硬化疾病的基因治疗新方法，同时也为超声联合造影剂介导的基因治疗提供新的思路。通过该课题研究，在国际刊物上发表SCI论文1篇，国内统计源期刊上发表论文1篇，另有1篇已接受待刊出，发表全国性会议论文2篇，培养博士研究生1名。