滤泡辅助性T细胞在白癜风黑素细胞抗体产生中的作用及机制研究

Follicular T helper cells (Tfh) are recently discovered as a specific subset of CD4+T cells which can help B cells activation and differentiation and production of antibodies. Vitiligo is one kind of autoimmune diseases characterized by progressive depigmentation caused by loss of functional melanocytes. Antibodies to melanocytes play an important role in the loss of melanocytes. However, it has been rarely reported about the Tfh activity in vitiligo. Our preliminary data showed that the proportion of CD4+CXCR5+PD1+Tfh and CD19+B cells in PBMC of patients with progressive vitiligo is significantly higher than those of controls. In this study, we will investigate Tfh and B cells in active, inactive and relapse vitiligo patients to demonstrate the association of Tfh with disease progression. Moreover, we will use T-B cell coculture in vitro system and transfer human peripheral mononucleus cells into NOD-scid mice to further systematically investigate the interaction of Tfh and its subsets with B cells in active vitiligo. We aim to make clear the detail functions of Tfh in auto antibodies production, its possible mechanism and key effective molecules to provide new reference for clinical prognosis and new targets for clinical therapy.

滤泡辅助性T细胞（Tfh）是近年发现的一个新CD4+T细胞亚群，专职辅助B细胞产生抗体。白癜风是以色素脱失为主要特征的一种自身免疫性疾病。黑素细胞自身抗体是造成黑素细胞缺失的重要原因之一。但目前对于Tfh在白癜风中的研究尚未见报道。我们前期研究发现，在进展期白癜风患者外周血中，B细胞和Tfh比例均显著高于正常对照，这提示Tfh很可能在白癜风发病中起到重要作用。本课题拟采用白癜风进展期、稳定期以及复发患者外周血检测系统、T-B细胞体外共培养体系和构建人免疫细胞反应平台——人PBL-scid小鼠，通过体内、体外实验，揭示Tfh各个亚群在白癜风发病过程中的变化规律，阐明人Tfh及其亚群在黑素细胞抗体产生中的作用及机制，并探寻Tfh在白癜风自身抗体产生中发挥关键作用的效应分子，为临床预后诊断提供新的参考依据，为白癜风临床治疗提供新的靶点。

滤泡辅助性 T 细胞（follicular T helper cells，Tfh）是新近发现的一个CD4+T细胞亚群，在辅助B 细胞活化、分化进而产生特异性的抗体中起到至关重要的作用。若Tfh 对自身反应性B 细胞产生过强的辅助信号，会引发抗体介导的自身免疫性疾病。白癜风是以功能性黑素细胞脱失为主要特征的一种自身免疫性疾病。在相当比例的白癜风患者血清中能够检测到抗黑素细胞的抗体，且抗体的检出率和滴度与疾病活动度密切相关。这提示自身抗体产生是白癜风自身免疫的一个重要组成部分。但迄今为止，国内外关于Tfh细胞在白癜风中的研究仍未见报道。.本课题组通过对各个发病阶段（主要是进展期）白癜风患者的外周血Tfh 各个亚群进行了研究，我们发现，在进展期白癜风患者外周血中，CD4+CXCR5+Tfh细胞比例显著高于正常对照[(22.57±5.9) % vs (19.6±4.9) %，P <0.05]。其中主要起辅助B细胞功能的Tfh17亚群（即CD4+CXCR5+ CCR6+ CXCR3+ T细胞）与Tfh2亚群（即CD4+CXCR5+ CCR6- CXCR3- T细胞）比例均显著增高{[(11.54±3.79) % vs (9.11±3.62)%，P <0.05]；[(2.11±1.39)% vs (0.76±0.71)%，P <0.01]}，而对B细胞无辅助作用的Tfh1亚群[(7.94±2.73)% vs (7.29±2.81)%]则无明显改变。另外，与正常对照相比，进展期白癜风患者血清中IL-21水平没有显著变化(23.82±3.14 vs 22.60±3.04）pg/ml，总IgA与IgG水平亦无显著性改变[(1.53±0.63 vs 1.36±0.11)pg/ml；(89.52±18.89 vs 83.18±21.40)pg/ml]; 然而血清中总IgE水平显著高于正常对照[(324.0±141.27 vs 209.8±136.71)pg/ml, P <0.05]。这些结果说明，白癜风进展期，外周血中辅助B细胞产生抗体的Tfh17和Tfh2细胞及总Tfh的的变化均显著增多，而这些变化直接导致血清中IgE类抗体水平的显著增高。这提示Tfh 很可能通过对自身免疫性B细胞的过度辅助通过产生IgE类抗体在白癜风发病中起到重要作用，这一发现对于临床治疗提供一个新的靶点和思路。