内蒙古包头地区隐孢子虫污染时空分子演变规律及其污染监测指示微生物筛选研究

Cryptosporidium spp. are common protozoan parasites which infect a wide range of hosts, including humans, livestock, companion animals and wildlife, worldwide. Infection with Cryptosporidium spp. can cause cryptosporidiosis , resulting in diarrheal illness in both humans and anmials. Transmission of Cryptosporidium spp. usually occurs through the direct fecal-oral route or through oocyst contaminated water or food. Literature data indicate that the livestock are the largest hosts, and the livestock farming are the major sources of Cryptosporidium spp. in environment. Inner Mongolia is an important livestock farming bases in China,the region of Baotou is a major production in Innor Mongolia.We will survey the contamination and infection of Cryptosporidium spp. and typical pathogenic microorganisms in livestock, human,soil,water and plants in restricted and non-restricted pasture.The results of the survey are the data for the evaluation of environmental behavior of livestock. Cryptosporidium samples will be genotyped to elucidate the effect of livestock farming on the environmental pollution of Cryptosporidium spp. and the infection of human.The correlation between the pollution of Cryptosporidium spp. and the pollution of typical pathogenic microorganisms will be analysed in order to screen the indicator organisms suit for the pollution monitoring of Cryptosporidium spp. in Innor Mongolia,which will be a feasible way for the pollution monitoring of Cryptosporidium spp. in environment.

隐孢子虫是一种常见人畜共患寄生性原虫，经粪-口途径传播，可致宿主感染隐孢子虫病，严重影响动物生长发育和人类健康，造成巨大经济损失，而掌握隐孢子虫污染状况对其防控具有重要意义。动物是隐孢子虫最大宿主，而畜牧业被认为是环境隐孢子虫主要来源。内蒙古是我国重要畜牧业基地，而包头是内蒙古主要畜牧业产地，本研究以包头地区典型的圈养和放养牧场为主要对象，针对畜、人、水体、土壤、植物等开展隐孢子虫和典型肠道微生物污染水平/感染率调查，为开展当地畜牧业畜类隐孢子虫污染的环境行为评价提供实验资料；通过隐孢子虫的基因分型研究揭示该地区隐孢子虫污染的分子演变规律，阐明畜牧业养殖畜类对环境隐孢子虫污染和人类隐孢子虫感染的影响，为隐孢子虫污染的防治提供理论依据；通过隐孢子虫与典型肠道微生物污染水平之间的相关性分析研究，筛选出适用于内蒙古包头地区隐孢子虫污染监控的指示微生物，为隐孢子虫污染监控提供一种便捷的方法。

隐孢子虫是一种常见人畜共患病原虫，可致宿主感染隐孢子虫病，严重影响人类健康和动物生长发育，而掌握隐孢子虫污染状况对其防控具有重要意义。动物是隐孢子虫最大宿主，而畜牧业被认为是环境隐孢子虫主要来源，了解畜牧业对环境隐孢子虫污染的影响具有重要意义。本研究以内蒙古包头典型牧区为研究对象开展污染调查研究，主要取得以下研究结果：.1.以反冲洗式滤囊为主体，融合双向蠕动泵和多种控制元件，研制出可重复使用的适用于水环境中隐孢子虫富集、洗脱的装置。.2.研制出用于水环境中隐孢子虫检测的质控试剂盒，其中质控试剂是以隐孢子虫卵囊表面抗原包被的荧光微球，免疫磁分离试剂为隐孢子虫卵囊表面抗体包被的纳米磁性颗粒，可以有效提高隐孢子虫富集、分离效果，并降低成本。.3.开展了包头典型牧区人、牛、土壤、水源、植被等的隐孢子虫、指示微生物、肠道条件致病菌的污染水平检测。牧牛隐孢子虫总感染率28.1%（233/828），其中圈养牧牛和散养牧牛隐孢子虫感染率分别为30.3%（124/409）和26.0%（109/419），不同季节牧牛隐孢子虫感染率由高到低依次为冬季34.6%（72/208）>夏季34.5%（70/203）>春季24.1%（49/203）>秋季19.6%（42/214）；沙门菌感染率4.6%（28/613）、志贺菌感染率4.4%（27/613）。牧区儿童隐孢子虫感染率37.2%（71/191），沙门菌感染率0.5%（1/191），志贺菌感染率3.1%（6/191）。牧区水样中隐孢子虫总检出率25.9%（7/27），总大肠菌群、耐热大肠菌群、肠球菌、粪链球菌、产气荚膜梭菌、沙门菌、志贺菌检出率依次为100%（27/27）、81.5%（22/27）、85.2%（23/27）、81.5%（22/27）、59.3%（16/27）、40.7%（11/27）、14.8%（4/27）。牧区饮用水、土壤、植被未检出隐孢子虫。.4.对隐孢子虫阳性样本进行了PCR扩增、测序、比对，PCR扩增阳性样本均为安氏隐孢子虫。 .5.基于本研究获得的数据，分析了隐孢子虫感染率与典型肠道微生物污染水平之间的相关性，发现所选择的细菌指标与隐孢子虫之间不存在相关性。