男性肝癌组织中特异性表达的长链非编码RNA-MSRY促进肝癌转移的分子机制研究

Extensive epidemiological data show that male primary hepatocellular carcinoma (HCC) morbidity and mortality is much higher than female. Previous studies have mainly focused on the regulation of sex hormones and their pathways. Basing on these findings, people designed a number of drugs. But the effect is not ideal. This indicates that the male and female hormones difference is not the all the reasons for the gender differences of HCC prognosis. In previous work, we found that a long chain of non- coding RNA (named lncRNA-MSRY), located in a specific region of the Y chromosome (MSY) , was specifically expressed in male HCC tissue. Preliminary results showed lncRNA-MSRY may have an important role in the progress of HCC metastasis. This study focuses on the downstream effector molecules and pathways of lncRNA-MSRY and the molecular mechanisms lncRNA-MSRY upstream activation of expression. The purpose of the study is to find potential new drug targets for HCC therapy.

大量的流行病学资料显示男性原发性肝细胞癌（肝癌）的发病率和死亡率均远远地高于女性，以往的研究认为其机制与性激素及其调控的信号通路有关，但以此为靶点的药物治疗收效甚微。前期的工作中我们发现定位于Y染色体上男性特异性区域的一个长链非编码RNA（命名为lncRNA-MSRY）特异性地在男性肝癌病人的癌组织中激活表达，而女性体内没有与之对应的基因组序列。预实验结果显示lncRNA-MSRY可促进肝癌的转移，其激活表达预示着肝癌病人的预后较差。本课题拟采用探针捕获深度测序、临床样品验证等手段对lncRNA-MSRY结合的蛋白、及其募集蛋白复合物至基因组特定位置的定位进行重点探究，揭示lncRNA-MSRY调控的下游效应分子和通路，并阐明控制lncRNA-MSRY表达的上游分子机制。为肝癌"性别差异之谜"的机制阐述提供新的角度，并为其治疗提供新的靶点。

原发性肝癌是世界范围内最常见的肿瘤之一，特别是在东亚地区。流行病学数据显示男性群体中肝癌的发病率要远远高于女性，已有的研究表明性激素及其相关的细胞因子可能是肝癌发生率性别差异的原因。然而针对性激素采取的各种干预策略，均收效甚微，甚至还导致各种不良反应。可见有必要对肝癌发生率的性别差异的机制进行进一步的探讨。.众所周知男性个体的体细胞中包含有1条X染色体和1条Y染色体，而女性个体的体细胞中含有2条X染色体。在我们的工作中一方面探讨了Y染色体特异性区段（X染色体及常染色体无同源序列）编码的长链非编码RNA RBMY2FP在肝癌发生中的作用。我们的结果显示该长链非编码RNA只在约1/3的男性肝癌病人的癌组织中表达，而在癌旁组织以及女性肝癌病人的组织中（包括癌组织和癌旁肝组织）均无表达。且癌组织有RBMY2FP表达的肝癌病人其预后要差于其他病人。在肝癌细胞中过表达该基因后发现RBMY2FP可促进细胞的增殖和“干性”特征的出现。进一步的研究结果显示RBMY2FP可与DNMT1相互结合，从而减少RBMY2FP及其同源基因RBMY1A1启动子区的DNA甲基化修饰，导致RBMY2FP和RBMY1A1在肝癌组织中的激活表达，从而促进肝癌的发生与进展。.另一方面，由于在女性的体细胞中需要进行X染色体的“失活”以保持X染色体上编码基因的“剂量”与男性相当。而在X染色体失活过程中存在着“失活逃逸”的现象。长链非编码RNA XIST就是失活逃逸基因的典型代表。我们的结果显示在女性的肝组织中XIST的表达量远远高于男性肝癌组织。与癌旁肝组织比较，肝癌组织中的XIST表达量均要降低（男性和女性病人均是如此）。在女性病人组织中还伴随着XIST第一个外显子区DNA甲基化修饰的增多（癌组织/爱旁组织）。进一步的分子机制研究结果表明与YY1相互作用的TET2可能是调控该区域甲基化改变的关键因子。.总之，深入探讨性染色体编码的长链非编码RNA的功能以及调控的机制，可能为探讨疾病发生率性别差异的机制提供新的角度和视野。