胃癌相关幽门螺杆菌HSP60分子特征及TLR信号通路研究

幽门螺杆菌为胃癌的I类生物致癌因子，TLR信号通路在肿瘤发生中起重要作用，HSP60作为TLR的重要配体与肿瘤发生具有密切关系。我们前期比较蛋白组学研究发现在幽门螺杆菌中普遍表达的HSP60在胃癌来源与非胃癌来源菌株中存在明显的pI差异，进一步研究初步发现以上两类菌株的HSP60基因序列存在显著性差异。本项目拟在前期工作基础上，通过基因序列同源对比分析在分子水平上进一步明确胃癌相关幽门螺杆菌HSP60的特征，利用RT-PCR、Western-blot、ELISA等方法研究胃癌相关幽门螺杆菌HSP60对细胞的炎症诱生作用，及其TLR类型和对ERK 通路、NF-κB 通路的影响，在分子水平、细胞水平两个层面解析其对TLR信号通路的影响，研究幽门螺杆菌HSP60分子差异导致其致癌性能不同的免疫学机制，旨在为胃癌相关幽门螺杆菌鉴别诊断方法的建立提供依据，为幽门螺杆菌致胃癌机制的阐明提供新线索。

本项目通过基因序列同源对比分析，发现在Hphsp60基因序列中有4个位点在不同来源菌株中存在显著差异，在分子水平上明确了胃癌相关幽门螺杆菌hsp60的特征序列。利用RT-PCR、Western-blot、ELISA等方法研究了胃癌相关幽门螺杆菌hsp60对细胞的炎症诱生作用，及其TLR类型和对ERK 通路、NF-κB 通路的影响。发现不同来源Hphsp60对TLR4和TLR2在mRNA水平和蛋白水平上的表达均有显著差异（P<0.05)。不同来源Hphsp60对MyD88mRNA的表达有显著差异（P<0.05)。Hphsp60作用组TLR2和TLR4mRNA表达之间有显著相关性(P<0.01)；但二者与MyDS8之间无相关性（P>0.05)。在Hp作用组，TLR2、TLR4和MyD88三者之间mRNA的表达均有显著相关性（P<0.05）。本研究结果有助于了解幽门螺杆菌HSP60分子差异导致其致癌性能不同的免疫学机制，为胃癌相关幽门螺杆菌鉴别诊断方法的建立提供了实验依据，为幽门螺杆菌致胃癌机制的阐明提供了新线索。