半夏泻心汤调节胃运动的缝隙连接机制及配伍规律研究

Cajal间质细胞（ICC）是胃肠慢波活动的起搏细胞，其功能依靠网络结构完成。缝隙连接（GJ）在ICC网络及ICC-平滑肌细胞的连接方面担任重要角色，一旦破坏将导致动作电位传递受阻，胃运动功能障碍。前期研究表明，著名治痞经方半夏泻心汤及其拆方通过ICC调节胃运动功能。我们据此提出半夏泻心汤通过ICC缝隙连接调节胃动力的假说，并以构成GJ最重要的缝隙连接蛋白Cx43为切入点，通过复制大鼠胃电节律失常模型，转染CX43-siRNA致ICC细胞通讯受阻、转染PCMV-Cx43cDNA致ICC细胞通讯过表达细胞模型，观察半夏泻心汤及其拆方对ICC-GJ超微结构、Cx43、PKC、PKA、MPA、SCF/c-kit及其mRNA表达、ICC细胞间通讯、ICC胞内第二信使[Ca2+]i及其受体变化的影响，以期从细胞间通讯角度，进一步揭示"心下痞"的内涵及半夏泻心汤调节胃运动的分子机制，阐明经方配伍规律。

缝隙连接（gap junction，GJ）是介导细胞间电化学信息交流，保证肌肉活动的协调性和同步性的特殊通道，广泛存在于Cajal间质细胞以及平滑肌细胞之间，一旦破坏将导致细胞间信号的传递受阻，胃运动功能障碍。前期研究表明，著名治痞经方半夏泻心汤及其拆方具有通过ICC调节胃运动功能的作用。我们据此提出半夏泻心汤通过细胞间缝隙连接调节胃动力的假说，并以构成GJ最重要的缝隙连接蛋白Cx43为切入点，依据此方“辛开苦降甘补”的配伍特点进行拆方，通过复制大鼠胃电节律失常模型，转染CX43-siRNA致细胞间通讯受阻细胞模型，观察半夏泻心汤及其拆方的干预作用，以期从细胞间通讯角度，进一步揭示“心下痞”的内涵及半夏泻心汤调节胃运动的分子机制，阐明经方的配伍规律。研究结果显示，模型大鼠肌间神经丛 Cx43 阳性表达最为密集，且分布不均匀，半夏泻心汤及其拆方能减轻模型大鼠形态学改变，降低模型大鼠胃电慢波频率变异系数，改善CX43的分布，降低CX43及其mRNA的表达，促进PKCα及其mRNA的表达，对胃电节律具有不同程度的调节作用。半夏泻心汤全方组药理作用显著优于其它拆方各组。进一步细胞实验结果表明，半夏泻心汤及其拆方含药血清具有不同程度促进胃肠平滑肌细胞增殖，调节Cx43介导的缝隙连接细胞间通讯（GJIC）的作用；对转染CX43-siRNA致细胞间通讯受阻GIST细胞具有增加细胞活力、促进Cx43介导的GJIC的作用，其机制可能与促进Cx43及其mRNA和抑制PKA、PKC、PKG表达有关。