肥胖相关蛋白AQP7调控绝经后脂肪代谢的机制研究

Postmenopause obesity is the health threaten problem. Its definite mechanism is not clear. Aquporin 7 was the main channel regulating glycerol outflow of adipocyte. Loss of AQP7 function leads to accumulation of glycerol and adipogensis. Our preceding findings revealed downregulation of AQP7 expression in postmenopausal women adipose tissue, estrogen treatment can upregulate adipocyte AQP7 expression in vivo and in vitro. On this basis, this study is planed to verify the relationship of AQP7 and postmenopausal adiposity by human sample and animal model, confirm the AQP7 action in estrogen controlled triglyceride metabolism by knockdown and overexpression of AQP7, clarify the molecular regulation mechanism of estrogen on AQP7 expression by various specific estrogen receptor agonist and antagonist, bioinformatics and molecular biotechniques. This research will replenish the theroy of estrogen action on obesity, and benefit for provention and therapy of postmenopause obesity.

绝经后肥胖严重威胁妇女健康，确切发生机制尚不清楚。水甘油通道蛋白7（aquaporin7，AQP7）是脂肪细胞甘油输出的主要通道，它的功能缺失将导致脂肪细胞内甘油积聚、甘油三酯合成加强。我们前期研究发现绝经后妇女脂肪组织AQP7表达下调，补充雌激素能上调去势雌鼠脂肪组织及离体脂肪细胞的AQP7表达。本项目拟进一步通过绝经前后不同体重指数妇女的临床资料和小鼠绝经模型明确AQP7表达与绝经后脂肪代谢变化的相关性；通过敲减和过表达等分子修饰的细胞模型，确定AQP7在雌激素调控脂肪代谢效应中的地位；利用特异性雌激素受体拮抗剂、生物信息学和分子生物学技术阐明雌激素对AQP7表达调控的分子机制。这将有助于补充和完善雌激素对脂肪代谢影响的理论体系，为绝经后肥胖的干预提供潜在的靶点。

绝经后肥胖严重威胁妇女健康，确切发生机制尚不清楚。水甘油通道蛋白7（aquaporin7，AQP7）是脂肪细胞甘油输出的主要通道，它的功能缺失将导致脂肪细胞内甘油积聚,随后甘油三酯合成加强。我们发现绝经后妇女脂肪组织AQP7表达下调，提示雌激素可能与AQP7的表达相关联。本项目通过小鼠绝经模型、敲减和过表达等分子修饰的细胞模型进一步确定了AQP7在雌激素调控脂肪代谢效应中的地位，并利用特异性雌激素受体拮抗剂和分子生物学技术阐明了雌激素对AQP7表达调控的分子机制。结果提示：去势后低雌激素状态导致小鼠体重增加、体脂向心性分布、在体脂肪组织上的AQP7表达下调而甘油三酯合成的关键酶——甘油激酶（glycerol kinase, GK）和脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase, LPL）上调，此种改变在内脏脂肪明显高于皮下脂肪。干扰脂肪细胞的AQP7进行及过表达的实验提示，雌激素可以通过调控AQP7的表达来调节甘油三酯的合成。对雌激素受体（estrogen receptor, ER）各种激动剂及抑制剂的作用进行对比，发现经典的核受体途径是雌激素调控AQP7表达的主要途径，且以ERα为主。本项目在生物信息学的提示下，进一步以染色质免疫共沉淀、荧光素酶报告基因、定点突变等实验方法确定了AQP7启动子区域上存在2个与ER结合的雌激素受体反应元件，推测ER是与该位点结合发挥促进AQP7 mRNA转录作用的。在本项目资助下，已发表SCI论文1篇（影响因子3.534），SCI杂志接受论文1篇（影响因子1.554），后期的实验结果论文也已完成撰写，拟投稿中。本项目直接培养了硕士生1名，间接培养博士生2名。项目负责人被单位列为生殖内分泌学科带头人、浙江省151第三层次培养人才。