辅助生殖治疗中HBV/HCV经配子垂直传播的风险研究

研究证实人类精子及卵母细胞中可以检测到HBV和HCV的病毒基因，因此有学者提出除常规认为经胎盘母婴垂直传播外可能存在受病毒感染的生殖细胞垂直传播方式，在受精时由精子或卵母细胞作为载体，将病毒基因带入胚胎进而使子代携带病毒或患病。基于此，本课题企图通过单细胞PCR，荧光原位杂交，荧光定量PCR等方法对HBV/HCV病毒携带夫妇在实施体外受精-胚胎移植治疗时可获取的废弃配子及胚胎进行检测，研究HBV/HCV感染配子是否具有正常受精功能，配子携带的病毒基因是否会整合或进入着床前胚胎，并随胚胎细胞分裂而复制？辅助生殖治疗中HBV/HCV携带者分娩子代的病毒携带风险等分子水平证据，了解辅助生殖治疗过程中HBV/HCV携带者经配子垂直传播的风险及影响因素，为预防乙肝、丙肝的垂直传播、孕期进行早期阻断和预防提供理论依据。

本课题希望通过对HBV/HCV感染者进行体外受精-胚胎移植治疗时获取的废弃配子及胚胎的检测，了解辅助生殖治疗过程中HBV/HCV患者经配子垂直传播的风险及影响因素。根据原定研究计划，我们采用单细胞PCR及荧光定量PCR等方法对HBV/HCV感染者的配子和胚胎进行了检测，发现在男性HBV/HCV感染者中，精液的体外处理（洗涤、离心）可以有效的去除精液中的HBV/HCV病毒，减少病毒的传播风险；女性HBV感染者中，虽然在卵泡液和体外培养液中未能检测到HBV DNA, 但是在卵母细胞和第三天的卵裂期胚胎中均发现了HBV-DNA, 说明携带病毒基因的配子可以正常受精，携带的HBV-DNA可以进入着床期胚胎，为HBV可能经配子垂直传播的假说提供了有力的分子证据；对女性HCV感染者的卵母细胞和胚胎检测中，未能发现HCV-cDNA；进一步对HBV/HCV感染者的体外受精治疗数据进行了分析，发现HBV/HCV感染者在体外受精治疗过程中，其卵巢反应性、促排卵药用量、获卵数、受精率、临床妊娠率、着床率、流产率与正常人群相比无差异，说明携带的HBV/HCV病毒对辅助生育治疗结局没有明显影响；对出生子代的随访发现HBV女性感染者的孕龄明显低于对照人群，新生儿体重、性别比、早产率、畸形率等与正常人群无差异。基本完成了课题原定的研究内容，证实了HBV病毒可以随配子垂直传播的可能，这对于完善HBV/HCV病毒传播机制，制定预防传播策略具有重要意义。对于辅助生育治疗中HBV/HCV子代的患病率数据，由于所需样本量大，追踪时间长，目前数据不完整，我们将在接下来的1-2年间，继续追踪随访，补充数据，得到完整资料后撰写此部分文章。目前已发表相关文章2篇，1篇已投稿。