KSHV编码的vFLIP蛋白通过泛素降解宿主SAP18蛋白促进内皮细胞侵袭与血管生成及其分子机制的研究

Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) infection caused KS, a malignant tumor that frequently happens to AIDS patients (AIDS-KS). AIDS-KS is of high invasion and metastasis, poor prognosis and significant mortality. KSHV encoded oncogenic protein vFLIP has been shown to promote cell survival, proliferation and tumor formation by activating NF-κB signaling, however, its role in KSHV-induced tumor dissemination and angiogenesis, and its underlying mechanism remain unknown. Recent pre-experiment showed that vFLIP had a strong ability of inducing cell invasion and angiogenesis, and Sin3A associated protein 18 (SAP18) degraded by ubiquitin-proteasome pathway might be involved in the process. Thus, our expectations are to identify that SAP18 is involved in vFLIP-induced cell invasion and angiogenesis, to elucidate the molecular mechanisms of vFLIP regulated SAP18 and SAP18 regulated vFLIP-induced cell invasion and angiogenesis, and to further confirm that SAP18, its interactive protein and the downstream genes participate in vFLIP-induced cell invasion and angiogenesis using reverse genetics assay. Our research will contribute to clarify the pathogenesis of KS induced by KSHV and provide potential targets for clinical prevention and therapy of AIDS-KS.

卡波氏肉瘤病毒（KSHV）感染导致卡波氏肉瘤（KS）在AIDS患者中频繁发生（AIDS-KS）。AIDS-KS侵袭传播性强、预后差、死亡率高。尽管KSHV vFLIP能够活化NF-κB通路促进细胞存活、增殖与肿瘤形成，但其在细胞侵袭和血管生成中的作用及机制目前尚不清楚。课题组近期的预实验结果显示，vFLIP能够促进内皮细胞侵袭和血管生成，其中被泛素降解的宿主蛋白Sin3相关多肽P18（SAP18）可能发挥重要作用。本项目拟（1）鉴定SAP18是介导KSHV vFLIP促进内皮细胞侵袭和血管生成的关键蛋白；（2）阐明vFILP调控SAP18以及SAP18参与上述过程的分子机制；（3）运用遗传学技术反向证实关键蛋白SAP18、SAP18结合蛋白及下游基因参与调控vFLIP诱导内皮细胞侵袭和血管生成。本项目致力于阐明KSHV诱导恶性肿瘤KS的发病机制，为临床防治AIDS-KS提供潜在的药物靶点。

卡波氏肉瘤（KS）作为艾滋病（AIDS）患者晚期常伴发的异常血管生成与高度侵袭转移的恶性肿瘤，预后差、死亡率高。卡波氏肉瘤病毒（KSHV）是KS的病原体。尽管KSHV编码的致瘤蛋白vFLIP具有促进细胞存活、增殖和肿瘤形成等功能，但其是否能够通过诱导内皮细胞侵袭与血管生成参与KS肿瘤形成，目前并不清楚。. 本研究证实了KSHV vFLIP能够通过下调SAP18/HDAC1复合物促进细胞迁移、侵袭和血管生成。KSHV vFLIP可作为支架蛋白招募E3泛素连接酶TRIM56，结合并降解SAP18。此外，vFLIP还可通过抑制Nanog与HDAC1启动子区的结合，进而抑制HDAC1的转录。而减少的SAP18/HDAC1可通过促进p65的乙酰化，进一步介导vFLIP诱导的NF-κB信号通路活化，从而促进内皮细胞的迁移侵袭与血管生成。 . 本项目还探讨了KSHV编码的其他致瘤蛋白在KSHV致病中的作用及其机制，包括（1）KSHV编码的致瘤蛋白vIRF1通过调控转录因子LEF1和转移抑制因子CD82上调CDCP1表达促进内皮细胞迁移和血管生成；（2）SAPG9通过激活JNK/VEGFA通路，参与调控KSHV vIRF1诱导的细胞转化和血管生成；（3）KSHV vIRF1通过调控lncRNA-OIP5-AS1/miR-218-5p互作网络，上调HMGB2和CMPK1表达，促进细胞侵袭；（4）KSHV编码的致瘤蛋白vIL-6通过增强STAT3介导的CAV1的表观遗传沉默，促进血管生成和细胞转化。这些研究结果有助于我们对KSHV诱导相关肿瘤发病机制的理解，将为AID-KS治疗提供新的治疗策略。. 本项目完成后共在 SCI 收录期刊上正式发表论文 5 篇。同时，本项目实施期间共申请国家发明专利4项，其中1项已获得授权。