卡波氏肉瘤病毒（KSHV）编码vIL-6诱导内皮细胞血管生成及其分子机制的研究

AIDS-related Kaposi’s sarcoma (AIDS-KS), led by Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) infection, is the most common cancer associated with HIV/AIDS patients. As one of the KSHV-encoded oncoproteins, the molecular mechanisms of viral interleukin-6 (vIL-6)-induced angiogenesis and oncogenesis remains unclear. Our laboratory has recently discovered that HIV-1 Tat and Nef promotes KSHV vIL-6-induced angiogenesis and tumorigenesis by regulating PI3K/AKT signaling pathway both in vitro and in vivo (Oncogene, 2013). By isobaric tags for relative and absolute quantification (iTRAQ), we have also obtained the comparative quantitative proteomics analysis of KSHV vIL-6-induced angiogenesis. However, the critical proteins of JAK/STAT pathway involved in KSHV vIL-6-induced angiogenesis are unknown.. Our expectations are to confirm that KSHV vIL-6 can induce angiogenesis in endothelial cells, to identify the comprehensive proteomics and critical proteins participated in vIL-6-induced angiogenesis, and to elaborate the correlated molecular mechanisms of the critical proteins in this progress.. Our research will contribute to investigate the molecular mechanism of the onset of AIDS-KS, which may provide some effective potential target for the prevention and treatment of AIDS-KS at the molecular level.

卡波氏肉瘤病毒（KSHV）感染导致艾滋患者中卡波氏肉瘤（AIDS-KS）频繁发生。KSHV病毒白介素6（vIL-6）通过调控JAK/STAT通路诱导血管生成，但参与此过程的下游靶蛋白并不清楚。课题组前期研究发现，艾滋病毒编码的相关蛋白能够协同KSHV vIL-6诱导血管生成（Oncogene，2013）。我们最近又通过iTRAQ技术获得了vIL-6诱导内皮细胞血管生成中的蛋白质组学差异表达谱。那么vIL-6通过调控JAK/STAT通路下游哪些关键蛋白诱导血管生成？. 本研究拟（1）证实vIL-6能够诱导内皮细胞血管生成；（2）鉴定此过程中的蛋白质组学差异表达谱及关键蛋白；（3）通过研究关键蛋白及其下游基因与JAK/STAT通路的关系，阐述vIL-6诱导血管生成的分子机制。. 本研究的结果将有助于阐明AIDS-KS致瘤机制，为AIDS-KS的治疗提供潜在的分子靶点。

卡波氏肉瘤病毒（KSHV）感染导致艾滋患者中卡波氏肉瘤（KS）的频繁发生。KSHV编码的病毒白介素6（vIL-6）被证实能够诱导血管生成和肿瘤形成，但其中的分子机制并不清楚。本项目在原代内皮细胞中稳定表达vIL-6蛋白，通过一系列体内外实验证实，vIL-6具有诱导内皮细胞增殖、迁移、侵袭、微管形成和血管生成的能力。进一步的iTRAQ技术获得了vIL-6在内皮细胞中的蛋白质组学差异表达谱，其中，小窝蛋白（CAV-1）的表达量显著下降，且恢复CAV-1的表达可以明显抑制vIL-6诱导的内皮细胞迁移和侵袭。机制研究表明，vIL-6通过与E3泛素连接酶结合，进而促进CAV-1发生泛素化修饰并降解。在对CAV-1下游调控的靶蛋白的鉴定中发现，vIL-6通过分别调控CAV-1/AKT和CAV-1/STAT3信号轴促进内皮细胞的迁移和侵袭。进一步的研究证实，AKT蛋白通过劫持宿主蛋白GRK2，帮助KSHV编码的miR-K3诱导内皮细胞的侵袭，并促进病毒潜伏感染与血管生成。与此同时，STAT3通路通过与SH3BGR结合，调控KSHV miR-K6-3p诱导的细胞迁移与血管生成。最后，本项目同时制备了抗vIL-6、抗RTA多克隆抗体，这些抗体能够成功检测重组和天然的vIL-6与RTA蛋白，可应用于对KSHV裂解期蛋白的生物学功能的研究。. 总之，完成该项目后在SCI收录期刊上共发表论文6篇，累计影响因子为40.81；申请国家发明专利2项，其中1项已授权；协助培养毕业3博士研究生和1名硕士研究生；7人次参加国际学术交流研讨会，其中5人次进行了大会发言；6人次参加国内学术交流研讨会并进行了大会发言。