游离脂肪酸调控血栓调节蛋白(TM)-蛋白C抗凝系统导致促凝血状态的机制研究

Metabolic syndrome displays a significant prothrombotic state, which induces the increased risk of myocardial infarction and stroke, but the mechanisms involved are not well understood. Metabolic syndrome is often characterized by high circulating concentrations of free fatty acids(FFAs), which may induce pathological thrombosis. Thrombomodulin-Protein C system is a magor anticoagulant system in vivo.This study is aimed to elucidate the effects of high FFAs level on the expression of TM-Protein C system and the prothrombotic state in metabolic syndrome. The mice are transfected with an adenoviral vector expressing pGSadeno-TM-shRNA to examine the effect of TM gene sliencing on the prothrombotic state.Furthermore, gene sliencing, EMSA and Chip assay are used to elucidate the possible signaling pathways involved.This study may be helpful to understand the mechanisms of the prothrombotic state in metabolic syndrome, and supply a new therapeutic target in treating and preventing cardiovascular diseases. So the study has the significant value and wide application foreground.

代谢综合征患者表现为显著的促凝血状态，导致心肌梗死、脑卒中等急性心脑血管事件的发生，但其发生机制尚不明确。游离脂肪酸升高是代谢综合征的重要特征，与促凝血状态的发生密切相关。血栓调节蛋白(TM)-Protein C通路是体内重要的抗凝系统。本研究拟通过动物和细胞两方面研究，探讨游离脂肪酸对TM-thrombin-Protein C通路的作用及与促凝血状态的关系。构建pGSadeno-TM-shRNA重组腺病毒载体，了解TM基因沉默对促凝血状态的影响。并通过基因沉默、EMSA、Chip assay等分子生物学方法探讨参与游离脂肪酸调控TM表达、导致促凝血状态的发生过程中的信号转导通路。本研究对于进一步了解代谢综合征中促凝血状态的发生机制具有重要的理论意义;　同时可为急性心脑血管疾病的预防和治疗提供新的思路和干预靶点，具有重要的社会价值。

代谢综合征(metabolic syndrome, MS)患者表现为显著的促凝血状态，造成患者病理性血栓的形成风险增加。临床上抗血栓治疗能够改善急性心脑血管疾病患者的生存率。游离脂肪酸(free fatty acids, FFAs)升高是MS的重要特征，与促凝血状态的发生密切相关。血栓调节蛋白(thrombomodulin, TM)-蛋白C系统是体内重要的生理性抗凝系统。虽然众多的研究发现TM表达降低与病理性血栓的形成有关，但是导致TM表达降低的具体机制尚不完全明确。. 本研究从动物和细胞两方面研究，初步探讨了FFAs对TM-蛋白C通路的作用及与促凝血状态的关系。通过构建了TM-shRNA重组病毒载体，了解了TM基因沉默对促凝血状态的影响。并通过多种分子生物学方法探讨了参与FFA调控TM表达的信号转导通路。. MS组小鼠体内FFAs水平升高，出血时间缩短；通过转染病毒载体抑制体内TM基因的表达，能进一步缩短出血时间。MS组小鼠主动脉中TM表达显著降低。游离脂肪酸抑制内皮细胞中TM mRNA和蛋白的表达，降低蛋白C的活性。 MAPKs应激信号中的JNK，P38 参与调控FFA抑制TM表达的过程。作为MAPKs的下游转录因子，Foxo1, ATF-2参与了FFA抑制TM表达的过程；而SP-1未参与调控这一过程。MS组小鼠血液中FFA水平升高，表现为明显的促凝血状态，主动脉中TM显著降低。抑制体内TM基因的表达，导致促凝血状态的加剧。在内皮细胞中，FFAs可能通过JNK，P38/Foxo1，ATF-2信号转导通路抑制TM的表达。. 本研究对进一步了解促凝血状态的发生机制具有重要的理论意义;　同时可为急性心脑血管疾病的预防和治疗提供新的思路和干预靶点。