慢性充血性心力衰竭大鼠过劳气虚状态下下丘脑室旁核CRH神经元激活相关机制及干预研究

Guided by the theory of TCM and with the combination of disease and syndrome as research idea, the animal model with Qi-deficiency will be established by overfatigue, CHF animal model will be established by left anterior descending branch ligation of coronary,and the CHF with Qi-deficiency animal model will be established by combination of the two above methods.As control in vivo CRH insufficient synthesis of Lewis rats, the relationship among activation of hypothalamic paraventricular nucleus CRH neurons, enhancement of the sympathetic activity, hemodynamic changes and ventricular remodeling with the status of Qi-deficiency. The further study will also be done to explore the change of some substances, for examlpe,the cerebrospinal fluid of PGE2, PVN tyrosine hydroxylase (TH), gamma-aminobutyric acid ( GAD67), neuronal nitric oxide synthase (nNOS), NE, glutamate and GABA content changes, as well as small microglial activation, TNFa, IL-1β, IL-6 and other inflammatory factors within the central.This study will help to reveal the pivotal role of the the CHF with qi-deficiency status and the hypothalamic paraventricular nucleus CRH neurons activation and the active machanism of compound Chinese medicine related to inhibit CHF sympathetic activation, and verify that the central nervous and chemical factors change are the impact factor of peripheral sympathetic activity in cardiac function deterioration.

以中医理论为指导，以病证结合为研究思路，以SD大鼠慢性力竭游泳建立气虚动物模型，冠状动脉左前降支结扎建立急性心肌梗死致心衰模型，二者迭加建立慢性心衰气虚病证结合模型，以体内CRH合成不足的Lewis大鼠做对照，探讨气虚状态下下丘脑室旁(PVN)核CRH神经元激活及其与交感神经活性增强、血流动力学变化及心室重构的关系。进一步研究脑脊液PGE2、PVN内酪氨酸羟化酶（TH）、γ-氨基丁酸（GAD67） 、神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、NE、谷氨酸和GABA含量变化，以及小胶质细胞活化、中枢内TNFa、IL-1β、IL-6等炎性因子变化。揭示慢性心衰气虚状态与下丘脑室旁核CRH神经元激活相关性及复方中药抑制慢性心衰交感神经激活的中枢作用机制；验证中枢神经化学因素影响外周交感活性使心功能恶化的慢性心衰中枢发病机制学说。

心衰时异常的心血管反射与中枢神经化学因素改变之间的相互作用受到高度关注。本研究以SD大鼠冠脉结扎建立急性心肌梗死致心衰气虚模型，探讨模型大鼠下丘脑室旁(PVN)核CRH 神经元激活及其与交感神经活性增强、血流动力学及心室重构的关系,揭示慢性心衰气虚状态与下丘脑室旁核CRH 神经元激活相关性及复方中药抑制慢性心衰交感神经激活的中枢作用机制，对于阐明中药方药的作用靶点具有重要价值。. 实验分正常组、假手术组、模型组、阳性药组、芪苈强心脑脊液组（QLNJ）、芪苈强心高剂量组（GQLRY）（20mg/ml）和低剂量组（DQLRY）（10mg/ml）。假手术组、模型组给予空白人工脑脊液0.25μl/h，阳性药组给予CRH 竞争性抑制剂αh-CRH （0.25μl/h）, QLNJ组给予含芪苈强心成分的脑脊液0.25μl/h，QLRY给与化学处理的芪苈强心溶液。采用侧脑室插管连接渗透压泵持续给药4周，其余各组不给予药物干预，另设体内CRH合成不足的Lewis大鼠及其同源纯种Fisher344大鼠作为对照。 . 主要结果：与假手术组比较，模型组大鼠血流动力学明显异常，心脏梗死区重量/体重显著增加，心肌纤维化，炎细胞侵润；Elisa示血液NT-proBNP等含量显著增加；免疫组化示下丘脑CRH、TNA-α、IL-6表达增加；PCR与Westernblot示下丘脑CRH 、TNF-α与IL-6等炎性因子基因及蛋白表达，脑垂体ACTH基因与蛋白表达水平显著升高；下丘脑NE、5-HT含量显著升高（P<0.05或0.01）。与Fisher344组比较，Lewis组上述指标显著下降（P<0.05或0.01）。与模型组比较，阳性药αh-CRH及芪苈强心组均可不同程度改善模型大鼠血流动力学；降低心脏梗死区重量/体重；改善心肌纤维化及炎细胞侵润；降低血液、下丘脑及脑垂体上述指标水平（P＜0.05或0.01）。. 研究结果初步证实了HF时下丘脑室旁核CRH 神经元激活与交感神经活性增强、血流动力学异常及心室重构具有相关性，芪苈强心可通过作用于下丘脑室旁核CRH神经元激活，改善血流动力学异常及心室重构。