麻口皮子药治疗类风湿关节炎的活性成分及作用机制的研究

本课题针对类风湿关节炎难以治愈和市场尚缺高效低毒的特异性治疗药物的状况，特选择祛风湿疗效良好的麻口皮子药，前期运用药效学方法筛选出了有效提取部位，并从有效提取部位的一部分中分离了15个化合物，包括一系列木脂素和一个生物碱，其中2 个为具有抑制巨噬细胞一氧化氮释放活性的新木脂素，而生物碱有直接杀伤巨噬细胞的活性。在此基础上，提出一个假设"麻口皮子药中木脂素类和生物碱类化合物→通过免疫抑制、抑制滑膜细胞增生、调节滑膜细胞MAPK信号通路和G蛋白的功能等途径→治疗类风湿关节炎"。围绕此假设，对麻口皮子药有效提取部位中木脂素类和生物碱类成分进行系统分离，对分离的化合物进行抑制滑膜细胞和脾淋巴细胞的增殖及抑制一氧化氮释放的活性筛选，同时，从免疫抑制、调节滑膜细胞MAPK信号通路和G蛋白的功能三个方面进行机制研究，揭示其作用物质基础和机制，为开发具有自主知识产权的新药和这一药用资源打下坚实的基础。

针对类风湿关节炎难以治愈和市场尚缺高效低毒的特异性治疗药物的状况，特选择祛风湿疗效良好的麻口皮子药进行研究。. 首先，采集麻口皮子药药材50kg，提取有效部位，采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶柱层析等进行分离纯化，得单体化合物，并通过波谱数据分析进行结构鉴定，从中分离鉴定了62个化合物，其中14个为新化合物，包括7个新木脂素二聚体、3个新生物碱和4个新木脂素。. 其次，对所分离的化合物进行了活性筛选，结果表明：木脂素二聚体和生物碱具有较好的抑制滑膜细胞增殖、抑制脾淋巴细胞增殖和抑制巨噬细胞释放一氧化氮产物的活性，IC50的范围分别为18.6 ～38.1 μM、13.8～ 74.3 μM和5.31～ 14.49 μM。. 再次，在活性成分研究有基础上，进行了作用机制研究。（1）免疫抑制作用：结果表明，麻口皮子药提取物可显著抑制ConA诱导的小鼠脾脏淋巴细胞和胸腺淋巴细胞的增殖，提示与正清风痛宁具有相似的抑制机体脾淋巴细胞和胸腺淋巴细胞免疫应答的功能。（2）体内和体外对CIA大鼠关节滑膜细胞MAPK信号通路的影响：体内试验结果表明，麻口皮子药提取物治疗后能有效抑制滑膜组织MAPK通路蛋白的磷酸化水平；体外试验结果表明，麻口皮子药提取物（62.5、12.5、2.5μg/mL）可明显降低由IL-1β诱导的ERK通路的磷酸化水平。. 通过研究，筛选出了治疗类风湿关节炎的活性成分,为木脂素二聚体和生物碱，诠释了麻口皮子药治疗类风湿关节炎的物质基础，同时，揭示了麻口皮子药治疗类风湿关节炎的机制为抑制关节滑膜细胞增殖、免疫抑制和调节MAPK信号通路，为开发具有自主知识产权的新药和麻口皮子药这一药用资源打下了较坚实的基础。