IL-11对新生儿坏死性小肠结肠炎的保护作用及其机制研究

新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC）发病率及致死率均较高，其发病机制尚未完全阐明，仍缺乏特异性治疗手段。研究表明，IL-11对多种肠上皮细胞损伤具有保护作用。然迄今，鲜见有关IL-11对NEC的保护作用及其信号转导机制研究报道。为此，本研究拟收集NEC患儿血和术中切除肠标本，并在体内外复制NEC模型，在整体、组织、细胞和分子水平上研究IL-11对肠道的保护作用及其信号转导机制，重点研究IL-11在NEC中的变化规律、IL-11对肠损伤与修复的影响；检测IL-11调控的Jak/STAT、ERK及PI3K/Akt通路中相关信号分子（Jak, STAT, Raf-1, ERK, PI3K, Akt等）的改变，并进一步探讨通路间相互调控作用，进而确定与NEC发生发展的关键分子，最后通过抑制剂等干预措施干预，并检测其对NEC肠道损伤与修复的影响，为阐明NEC发病分子机制并寻找特异性治疗方案奠定基础。

目的和意义.NEC是早产儿最严重的胃肠并发症，其发病机制尚未完全阐明，仍缺乏特异性治疗手段。研究表明，IL-11对多种肠上皮细胞损伤具有保护作用。然迄今，鲜见有关IL-11在NEC领域研究报道。为此，本研究拟探讨IL-11在NEC中的作用及其机制，为NEC诊治提供新的思路。.材料和方法.收集NEC和对照组患儿外周血清和肠标本；新生SD大鼠经人工喂养+缺氧90s+胃注4mg/kg脂多糖（LPS）处理复制NEC动物模型，IL-11组在NEC造模结束后即刻、12h、36h腹腔注射400μg/kg IL-11） 治疗结束后12h、36h、72h、120h活杀取材；100μg/ml LPS加入培养的IEC-6细胞，建立NEC体外模型，予100ng/ml rhIL-11处理。通过ELISA、HE染色、TUNEL、MTT、流式细胞术、免疫组化、免疫印迹、定量蛋白质组学、图像分析等研究血清IL-11水平、差异表达蛋白质组学、肠道病理变化、细胞凋亡和坏死率以及IL-11、IL-11Rα、Bax、Bcl-2和PCNA表达、STAT3活化的变化。.结果.早产NEC患儿外周血IL-11水平反应性升高， 但人和大鼠NEC肠道IL-11及受体表达下降。应用IL-11治疗减轻大鼠肠道损伤，促进恢复。IL-11可上调大鼠肠道IL-11及受体表达，并调节Bax和PCNA表达。.NEC体外实验显示：IL-11可抑制Bax表达，上调Bcl-2和PCNA表达，促进STAT3活化，降低IEC-6凋亡率，促进增殖。.定量蛋白质学共鉴定和定量了1599 种蛋白，差异表达显著的蛋白有69 种(38种下调，31种上调)，涉及急性相反应、炎症及脂多糖反应、细胞黏附、碳水化合物结合、补体级联反应、蛋白消化和吸收、胶原降解、IL-6和notch信号通路等。.结论.1. IL-11及其受体参与NEC病理过程，应用IL-11具有保护作用。其机制与IL-11上调IL-11Rα、Bcl-2、PCNA表达，下调Bax表达，促进Jak/STAT通路活化有关。.2. NEC患儿外周血筛选出的差异蛋白可进一步研究以明确其在NEC中的作用，有助于阐明NEC机制并为诊治提供新依据。.