miR-125b调控神经胶质瘤细胞增殖与凋亡的分子机制

microRNAs与肿瘤的发生关系密切，某些microRNAs的表达水平变化精确反映了肿瘤发生和恶变程度。miR-125b的表达随着恶性胶质瘤恶性程度升高表达水平增加，在人恶性胶质瘤细胞U87,U251,TJ905和大鼠脑胶质瘤细胞C6中表达显著上调，体外试验结果表明,在胶质瘤细胞中过表达miR-125b的模拟物，导致细胞增殖加速；相反敲除内源性miR-125b的表达，可以显著促进细胞凋亡， 但对miR-125b与细胞增殖与凋亡的关系尚不明确。本项目将进一步研究miR-125b在不同级别恶性胶质瘤中表达特性和意义及其对胶质瘤细胞致瘤性的影响；探讨miR-125b 影响恶性胶质瘤细胞增殖和凋亡的通路和作用靶基因，并通过建立体外鉴定microRNAs相互作用靶基因和体内细胞验证相结合的方法，筛选miR-125b靶基因。

胶质瘤是中枢神经系统肿瘤中最常见的恶性肿瘤，miRNAs的异常表达与胶质瘤的发生密切相关。本研究系统研究了miR-125b调控胶质瘤生长与凋亡的分子机制。利用Real-time PCR技术检测了在正常人脑组织、WHO分级不同的胶质瘤组织和3种胶质母瘤细胞中miR-125b的表达情况。结果表明，miR-125b在胶质瘤组织中的表达特性随着胶质瘤恶性程度升高表达上调。过表达miR-125b促进胶质瘤细胞的增殖，细胞S期增加。通过转染2’ 甲氧基修饰的miR-125b的反义寡核苷酸敲低内源性miR-125b的表达，胶质瘤细胞增殖受到抑制。进一步研究证实降低内源miR-125b的表达促进胶质瘤细胞凋亡。在临床恶性程度不同的胶质瘤中，miR-125b随着胶质瘤恶性程度加深表达量升高。说明miR-125b很可能成为恶性胶质瘤分级的分子标志，并提示其可能参与调控胶质瘤的细胞增殖和细胞恶性化。同时，将miR-125b与化疗药物替莫唑胺（TMZ）联合应用，结果表明下调内源MiR-125b表达可增强胶质母瘤对TMZ的敏感性。提示miR-125b在胶质瘤中过表达可能是造成替莫唑胺耐药的因素之一。.对miR-125b的调控靶点进行研究，发现miR-125b可以负调控p53和p38MAPK的表达从而参与细胞凋亡的调控。但miR-125b对细胞凋亡的调控并不依赖于p53和p38MAPK的表达。进一步研究证实，miR-125b通过多靶点协同调控神经胶质瘤细胞增殖和凋亡。.此外，在本项目的实施过程中还发现，miR-26b在神经胶质瘤细胞中可能起到抑癌基因的作用，EphA2基因是miR-26b在胶质瘤细胞中的直接靶基因。miR-26b能过特异性抑制EphA2的表达从而抑制胶质瘤细胞增殖和血管生成拟态的形成。.本项目系统研究了miR-125b和miR-26b在胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞中的作用，并明确了其作用的靶基因，为深入理解miR-125b和miR-26b的功能奠定了基础。此外，这两种microRNA可能成为胶质瘤诊断的标志物，并且mir-125b可能成为胶质瘤治疗的有效靶点。