离子注入微生物诱变效应研究

抗人肿瘤坏死因子α基因工程抗体的研究对防治感染性休克、组织损伤和自身免疫学疾病具有重要意义。本研究探讨了两种小分子抗体，主要取得以下结果；1.获得功能性重排的鼠抗 hTNF-α(E6)抗体轻、重链可变区基因和异常重排的κ轻链可变区基因，说明E6细胞中编码有功能κ轻链的转录物在数量上远远低于异常重排者。2.构建并在大肠村菌中高效表达了具有抗原结合活性的抗hTNF-α单域和单链抗体。其中单链抗体具有较强的中和活性，与亲本单抗具有相同的抗原识别表位，在酵母细胞内可与hTNF-α相互作用。3.证实TIR二级结构影响释译的起始，而表达时间是影响ScFv表达量的重要因素。对蛋白复性条件的研究表明抗原的诱导可明显提高抗体蛋白的复性效率。