滋肾清热利湿化瘀方干预肠道菌群及影响PCOS的分子机制研究

The polycystic ovary syndrome (PCOS) is one of the most common endocrine disorders in women of childbearing age. The harm of this disease and its long-term complications are related to metabolic disorders. Currently, the study shows that intestinal flora plays an important role in PCOS. Our previous research confirmed that ZiShen-QingRe-LiShi-HuaYu formula can significantly improve the symptoms of PCOS patients. In this study, we will illuminate the influence of ZiShen-QingRe-LiShi-HuaYu formula on the intestinal flora of PCOS patients using 16S sequencing technology. We will test the correlation between intestinal flora and PCOS and the intervening action of ZiShen-QingRe-LiShi-HuaYu formula using animal model. We wil also clarify the influence of ZiShen-QingRe-LiShi-HuaYu formula on the intestinal flora of PCOS and the relation between specific flora and certain metabolites using Metabonomics and metagenomics technology to explore the novel therapeutic target ZiShen-QingRe-LiShi-HuaYu formula in PCOS. The findings can help us understand the molecular mechanism of ZiShen-QingRe-LiShi-HuaYu formula in PCOS, and provide new insights of molecular targeted therapy into PCOS;and also contribute to modernize the excessive and the deficiency syndrome pathogenesis of “kidney deficiency as its root and the damp-heat, turbid phlegm and blood stasis as its manifestation” with PCOS.

多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome，PCOS)是育龄期女性最常见的内分泌疾病，然而本病的危害及其远期并发症均与代谢紊乱有关。目前研究表明肠道菌群在PCOS发病中占有重要地位。我们前期研究已证实，滋肾清热利湿化瘀方能显著改善PCOS患者症状。本项目中我们将在前期工作基础上，利用16S测序技术，明确滋肾清热利湿方对PCOS患者肠道菌群的影响；进一步通过动物模型验证肠道菌群与PCOS的相关性及滋肾清热利湿方的干预作用；利用代谢组学结合宏基因组学技术并运用生物信息学方法，明确滋肾清热利湿方影响PCOS肠道菌群的标志物及特定菌群与特定代谢谱之间的关联，期望明确滋肾清热利湿方治疗PCOS的新靶点。研究结果有助于我们理解该方治疗PCOS的分子作用机制，为相关患者分子靶向治疗提供新思路；也将有助于对PCOS“肾虚为本，湿热痰浊瘀血为标”的虚实夹杂中医病机进行现代诠释。

多囊卵巢综合征（PCOS）是一种妇科高发疑难疾病，以排卵障碍为主要特征，目前发现PCOS的发病机制与肠道菌群关系密切，调节肠道菌群可能是PCOS防治的一种新型策略。滋肾清热利湿化瘀方（简称：滋肾方，ZQLHF）是本团队多年临床实践过程中治疗PCOS得出的自拟方，临床疗效确切，突破了当前PCOS对症治疗的现状，但其具体的机制尚不清楚。为探究滋肾方治疗PCOS的疗效机制，本研究开展以下研究：.（1）从人体水平明确PCOS患者与健康女性的肠道菌群存在差异，并证明滋肾方可调控肠道菌群增加PCOS患者肠道内菌群考拉杆菌属Phascolarctobacterium、劳特氏菌属Blautia的丰度，进而恢复PCOS患者的自主排卵月经周期。.（2）从动物水平验证滋肾方低、中、高剂量均可不同程度的改善PCOS大鼠体内性激素紊乱状态及改善卵泡发育，其中中剂量浓度干预效果最佳；进一步从动物水平明确PCOS大鼠与正常大鼠的肠道菌群有差异，并证实滋肾方可明显改变PCOS大鼠肠道菌群结构，增加罗斯氏菌属Roseburia、丁酸梭菌属Butyricicoccus的丰度；.（3）进一步以滋肾方治疗有效PCOS患者为对象，通过微生物学组学和菌群移植实验揭示滋肾方治疗PCOS的疗效机制，其调控的关键菌群主要包括拟杆菌属（Bacteroides）、毛螺菌属（Lachnospira）、萨特氏菌属（Sutterella）、毛螺旋菌科UCG-0004属（Lachnospiraceae_UCG_004）。.（4）最后通过血清代谢组学明确滋肾方有效治疗PCOS的产生的内源性标志性代谢物涉及刺槐素、大黄酸、芹菜素-7-葡萄糖醛酸、紫花牡荆素、黑粉菌素、1-羟基茚满、可替宁N-葡萄糖醛酸苷、白芷属脑、汉黄芩素、L-酵母氨酸等；潜在调控的关键代谢过程主要包括α-亚麻酸代谢、丙酸代谢、氨基酸代谢等途径。.本研究从人体和动物水平系统揭示了滋肾方可调控肠道菌群治疗PCOS，其疗效机制与调控拟杆菌属、毛螺菌属、萨特氏菌属、毛螺旋菌科UCG-0004属等关键菌群有关，并与干预α-亚麻酸代谢、丙酸代谢、氨基酸代谢等关键代谢途径相关，这从肠道菌群-代谢角度为滋肾方治疗PCOS提供了新的科学依据。