花粉管通道介导的反义ACS基因转化牡丹的机理研究

以结实力强的牡丹品种'凤丹白'为试材，人工授粉后定时采摘雌蕊，应用石蜡切片法研究牡丹花粉粒在柱头上的萌发、花粉管通道在花柱、胚囊中的形成进程，牡丹双受精作用及合子形成细胞壁的进程；基于牡丹花粉管通道形成的细胞胚胎学观察，确定花粉管通道介导的牡丹转基因技术适宜的转化时期；以'凤丹白'为转化受体，采用正交试验设计方法，将含有GUS报告基因和选择性标记基因NPT-II的pBI121质粒导入牡丹基因组，探讨导入时间、外源DNA浓度、不同的导入方式等因素对花粉管通道介导的牡丹转基因转化率的影响，建立适宜于牡丹的高效转基因技术体系，为定向调控牡丹观赏性状建立技术平台；克隆矮牵牛花特异表达启动子pCHSA及牡丹ACS cDNA基因，构建pCHSA融合反义ACS的植物表达载体并转化牡丹，PCR、PCR-Southern分子鉴定获得牡丹阳性转化植株，探索花粉管通道介导的转基因方法在牡丹分子育种中的可行性。