猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp1蛋白的锌指结构影响机体I型干扰素信号通路的机制研究

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染猪体后能够破坏猪体的免疫系统，引起I型干扰素（IFN）下调。目前国内外研究认为PRRSV的 Nsp1蛋白是引起机体I型IFN下调的最主要的蛋白，但是对Nsp1蛋白的氨基酸序列中具体起I型IFN下调作用的蛋白区段或结构并没有做进一步的研究。本研究拟运用定点突变技术或者SOE-PCR的方法，突变或者缺失PRRSV Nsp1蛋白的锌指结构的位点，运用Luciferase、Western-blot、IFA及Real-time PCR等技术方法来研究PRRSV Nsp1蛋白的锌指结构是否直接影响I型IFN下调；通过PRRSV感染性cDNA平台突变或缺失Nsp1蛋白的锌指结构，拯救病毒；并对突变或缺失锌指结构的PRRSV进行猪体免疫后的体液免疫和细胞免疫水平的分析比对，阐述突变或者缺失PRRSV的锌指结构对于研发PRRS新型疫苗的意义。

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染猪体后能够破坏猪体的免疫系统，引起I型干扰素（IFN）下调。目前国内外研究认为PRRSV的Nsp1蛋白是引起机体I型IFN下调的最主要的蛋白，但是对Nsp1蛋白的氨基酸序列中具体起I型IFN下调作用的蛋白区段或结构并没有做进一步的研究。本研究运用定点突变技术或者SOE-PCR的方法，突变或者缺失PRRSV Nsp1蛋白的锌指结构位点或者其出核信号（NES），运用Luciferase、Western-blot、IFA及Real-time PCR等技术方法证实PRRSV Nsp1蛋白的第1个锌指结构直接影响I型IFN下调，Nsp1的NES对Nsp1抑制IFN-β启动子的活性非常重要。此外，流行病学调查研究发现，PRRSV Nsp1基因变异不大。本研究全面阐述了PRRSV Nsp1蛋白抑制机体I型干扰素信号通路的机制。