靶向CCR7反义肽核酸处理联合调节T细胞回输局部抑制免疫排斥反应在异体复合组织移植中的应用

外科手术和抗排斥药物的进步使同种异体复合组织移植（CTA）在临床实践中获得初步成功，为体表重度毁损伤的整复再造展示了令人振奋的应用前景。但排斥反应和大剂量非特异性免疫抑制剂的毒副作用却始终是制约CTA发展的瓶颈，因而探寻安全有效的局部靶向免疫抑制疗法成为CTA领域亟待研究的关键问题。趋化因子CCR7及其配体的相互作用，是免疫应答发生过程中的关键点，参与树突状细胞等多种免疫细胞的归巢，因此，也是防治免疫排斥反应的理想阻断靶点。本课题拟利用CTA位于体表、耐缺血时间长的优势，利用靶向CCR7反义肽核酸处理移植物，并联合术后调节性T细胞局部回输，阻断免疫应答过程，从而减少CTA术后移植物排斥反应的发生，诱导异体复合组织移植物（CTAs）局部免疫耐受，降低全身免疫抑制剂的用量，为CTA发展寻找新的突破口。

近年来，随着新型免疫抑制药物的问世及组织配型技术的精进，移植外科又一次飞跃式发展，整形外科学者也加强了在异体复合组织移植领域的探索。然而，CTA移植的发展远远滞后于内脏器官移植，究其根本，是因为其组分复杂，抗原性不均一。自1998年Dubernard首次成功实施手移植以来，截止2013年07月全球已完成89例手移植， 27例换脸。如何最小化免疫抑制剂应用的风险，仍旧是CTA移植领域的研究重点。.异体复合组织移植排斥反应的发生遵循着免疫应答的一般规律，即首先对外来的同种异体抗原进行免疫识别，继而进入活化阶段，最终产生对移植物的免疫排斥，因此，选择性阻断其中任一环节，均有可能诱导移植免疫耐受。.树突状细胞是最主要的抗原提呈细胞，其表面高水平表达MHC-II类分子以及共刺激分子CD80、CD86，通过第二信号刺激途径，激活初始T细胞。但是在它成熟之前，这些分子呈低表达，以吞噬功能为主，提呈功能为辅，甚至可以诱导T细胞凋亡或者无能。未成熟树突状细胞回输治疗方案理想的备选细胞。调节性 T 细胞(Treg)是维持外周免疫耐受的重要细胞亚群,其功能机制是目前免疫学领域研究的热点。本项目尝试应用一种改良的iTreg体外扩增方法，研究其诱导异体移植物耐受中的作用。研究表明这两种细胞可通过诱导外周耐受延长异体复合组织移植的存活。.项目组在研究中发现，血管化骨髓移植（VBMT）较骨髓干细胞移植（BMT）具有更大的致耐受潜能。因而本课题组推测，VBMT特有的骨髓niche微环境发挥了重要作用。 我们在受体胸腺找到了供体来源的树突状细胞，并观察到其与多个受体胸腺细胞的短暂接触行为，体内实验也提示了供体DC可能参与受体胸腺内抗供体反应性T细胞的克隆清除，从而诱导受体的中枢性耐受。.本项目同时关注了供体骨髓Niche成分可能诱导免疫耐受状态的机制。目前，活体示踪技术也发现供体来源的骨髓造血干细胞早期主要迁移到受体的骨内膜区域。研究发现骨内膜骨髓细胞在诱导造血干细胞的生存及分化等能力，比中央骨髓细胞明显高。因此，骨髓骨内膜区域及其中细胞也许在免疫耐受状态的诱导中具有重要的作用。