本项目通过建立肝素酶(HPR)基因启动子的反义RNA Tet-on基因表达调控系统,通过采用染色质免疫沉淀、实时定量RT-PCR、Western杂交和亚硫氢酸钠修饰基因组测序等技术,对启动子相关反义RNA在转录水平上使高转移潜能肝癌细胞-MHCC97M3的HPR基因稳定、长久沉默的DNA甲基化、组蛋白甲基化和去乙酰化等表遗传学机制进行研究;观察并比较HPR基因启动子和cDNA两种类型反义RNA对MHCC97M3细胞HPR基因表达抑制的持久性、体内外浸润和转移能力的影响;旨在明确启动子相关反义RNA通过表遗传学机制使HPR基因在转录水平沉默;这种沉默只需靶基因短暂暴露于启动子反义RNA,但作用是持久的和可遗传的,并可使高转移潜能肝癌细胞侵袭和转移能力显著下降。该项目研究成果将进一步阐明基因启动子相关反义RNA作用的核内机制,为定点、长期有效敲除靶基因奠定了实验基础,为肝癌的治疗提供了新的思路
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数据更新时间:2023-05-31
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