抗菌肽Shiva-I基因转入泡桐及抗类菌原体的研究

完成了计划内容。将构建好的含shiva-Ⅰ基因的高效表达载体P438PRS用点激法导入农杆菌LB4404，供转化用；选出芽分化和生根的最佳激素组合，建立了泡桐组培及植物再生系统；取健康及患丛枝病的泡桐的组培茎段为转化受体，与农杆菌共培养3天，将shiva-Ⅰ基因导入泡桐；用卡那霉素筛选获得转基因植物40棵，栽种于温室大盆；进行PCR和Southern杂交等分子鉴定，证明shiva-Ⅰ基因已整合到泡桐的染色体上，转基因株已成活并能正常生长的有22株；用PWBMLODNA探针对其进行点杂交，病株病原含量下降明显；经过一年温室病情鉴定，其外表病症平均严重度比未转化的对照株病症降低了三级；将2株恢复正常状态及1株健康转基因株选为模式转基因泡桐。该成果对防治类菌原体病害是个突破，意义深远。