基于NF-kB信号通路研究泻火解毒法治疗竹叶青蛇伤血管内皮炎症损伤机制

Trimeresurus snakebite is one of the most common poisonous snakebites.The venom of Trimeresurus stejnegeri can induce general vascular endothelial inflammatory reactions,which are very harmful to human bodies.The basic mechanisms of the trimeresurus snakebites are〝virulent fire"and〝toxin hurts collaterals〞in traditional Chinese medicine.According to the routine treatment〝treat heat with cold"of Huang Di Nei Jing,we use the snakebite capsule which is characteristic of purging fire and removing toxin to cure vascular endothelial inflammatory damages caused by trimeresurus snakebites.The therapeutic results are satisfactory,however the mechanism of which remains unclear.Combined to the characteristics of vascular endothelial inflammatory reactions caused by Trimeresurus snakebites,this research takes the NF-kB signaling transduction pathway related factors such as IL-1β，IL-2，IL-6，TNF-α，IKK，NIK，IkBα，NF-kBp65，ICAM-1，VCAM-1，CD62E，CD62P，MCP-1 and IL-8 as the main research subject,aiming at exploring the possible targets of the therapy of purging fire and removing toxin's effect on trimeresurus snakebite-induced inflammatory responses both in vivo and in vitro experimental models.This research is expected to clarify the mechanism of the therapy of purging fire and removing toxin on treating Trimeresurus Snakebite-induced vascular endothelial inflammatory reactions and it also contributes to enriching the scientific connotation of the Traditional Chinese Medicine in the treatment of poisonous snakebites.

竹叶青蛇伤是最常见的毒蛇咬伤之一。竹叶青蛇毒可引起广泛的血管内皮炎症损伤，对人体造成严重的影响。竹叶青蛇伤的基本病机是火毒炽盛、毒损络脉。根据《黄帝内经》"热者寒之"的正治之法，以泻火解毒法代表方蛇伤胶囊治疗竹叶青蛇伤血管内皮炎症损伤，临床疗效肯定，但作用机制未明。本研究结合竹叶青蛇伤血管内皮炎症损伤的特征，以血管内皮细胞NF-kB信号转导通路相关因子IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α、IKK、NIK、IkBα、NF-kBp65、ICAM-1、VCAM-1、CD62E、CD62P、MCP-1、IL-8等为主要研究指标，从体内外实验研究泻火解毒法干预竹叶青蛇伤血管内皮炎症损伤的可能作用靶点。本研究可望阐明泻火解毒法治疗竹叶青蛇伤血管内皮炎症损伤的作用机制，并丰富中医治疗毒蛇咬伤的科学内涵。

竹叶青蛇毒可引起广泛的血管内皮炎症损伤，对人体造成严重的影响。竹叶青蛇伤的基本病机是火毒炽盛、毒损络脉。根据《黄帝内经》“热者寒之”的正治之法，以泻火解毒法代表方蛇伤胶囊治疗竹叶青蛇伤血管内皮炎症损伤，临床疗效肯定，但作用机制未明。本研究结合竹叶青蛇伤血管内皮炎症损伤的特征，以血管内皮细胞NF-kB信号转导通路相关因子IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α、IKK、NIK、IkBα、NF-kBp65、ICAM-1、VCAM-1、CD62E、CD62P、MCP-1、IL-8等为主要研究指标，从体内外实验研究泻火解毒法干预竹叶青蛇伤血管内皮炎症损伤的可能作用靶点。结果：模型组血WBC、MO、IL-1、IL-2、IL-6、TNF-α和HUVEC培养液中IL-1、IL-2、IL-6、TNF-α水平均较对照组明显升高（均P<0.05），随着药物剂量增加，低、中、高剂量蛇伤胶囊组上述指标均较模型组下降，以中剂量蛇伤胶囊组降低更显著（均P<0.05）。&nbsp;MX组的IL-8、MCP-1、ICAM-1和VCAM-1 mRNA水平及CD62E含量相对KB均出现了显著的升高（P<0.01）。DY组、ZY组和GY组的IL-8、MCP-1、ICAM-1和VCAM-1 mRNA水平相对MX组均出现不同程度降低（P<0.05或P<0.01）；三组的CD62E含量亦均较MX组降低，其中ZY和GY降低水平显著（P<0.01）。动物实验中，MX组IKK、NIK和NF-kBp65含量较KB组均出现了显著升高（P<0.01）；ZY组和GY组的IKK、NIK和NF-kBp65含量较MX组均出现显著降低（P<0.05或P<0.01）。细胞实验中， MX组HUVEC中IKK、NIK和NF-kBp65的蛋白表达较空白组显著升高（P<0.05或P<0.01），DY组和ZY组HUVEC中IKK、NIK和NF-kB p65蛋白表达较MX组显著减少（P<0.05或P<0.01）；激光共聚焦显微镜下MX组HUVEC中NF-kB p65的表达显著高于KB组（P<0.01），而DY组和ZY组HUVEC中NF-kB p65的表达较MX组显著下降（P<0.01）。 结论 NF-kB信号通路是竹叶青蛇伤血管内皮细胞炎症损伤的关键，泻火解毒法可通过调控该信号通路来治疗竹叶青蛇伤血管内皮细胞炎症损伤。