基于PI3K/Akt信号通路介导HSPA12B对血管内皮的调控探讨益气活血解毒法对脓毒症急性肺损伤的作用机制研究

Sepsis has become the focus of research in the field of intensive medicine due to its complex pathogenesis and high mortality, acute lung injury is one of the most serious complications of sepsis.It is of great significance to explore its mechanism and find the drug to improve the sepsis-induced acute lung injury.We found that HuaXian capsule had an improved effect on inflammatory factors, immune function and coagulation function in acute lung injury with sepsis rats model, and had protective effect on sepsis-induced acute lung injury,present the hypothesis of using Yiqi Huoxue Jiedu Method make heat shock protein A12B in vascular endothelial cell high expression, treating sepsis-induced acute lung injury by PI3K / Akt signaling pathway,and the raise hypothesis was validated by ELISA and western blot, explicit Yiqi Huoxue Jiedu preparation HuaXian capsule's mechanism and deep targets for treat sepsis-induced acute lung injury in sepsis, richYiqi Huoxue Jiedu prescription's scientific connotation for the treatment of sepsis effectively.

脓毒症因其死亡率高、发病机制复杂成为重症医学领域的研究重点，其中急性肺损伤是脓毒症最严重的并发症之一，探讨脓毒症急性肺损伤的发病机制并寻找治疗的有效药物具有重大意义。我们在前期研究中发现益气活血解毒法化纤胶囊对脓毒症急性肺损伤大鼠模型的炎症因子、免疫功能、凝血功能具有改善作用，并且对脓毒症大鼠急性肺损伤具有保护作用。在此研究基础上进一步提出应用益气活血解毒法使血管内皮细胞热休克蛋白A12B高表达，通过PI3K/Akt信号通路的介导治疗脓毒症急性肺损伤的假设，并运用ELISA、western blot等技术对上述假设进行验证，从作用靶点角度阐明确有益气活血解毒疗效的化纤胶囊对脓毒症急性肺损伤调控的机制，丰富益气活血解毒方药有效治疗脓毒症的科学内涵。

脓毒症（Sepsis）是由感染失控引起的宿主反应导致的危及生命的器官功能障碍，是临床上死亡率较高的危重疾病。脓毒症的最大挑战是对其发生发展的潜在病理生理机制更详细的了解与精准度高的预警诊断指标和标准化的治疗方案，探索脓毒症的发病机制与寻找有效的治疗手段刻不容缓。本课题组在前期研究中完成了化纤胶囊对脓毒症大鼠TERM-1转导通路的干预作用的相关基础研究，在临床中取得了良好的疗效，但未能探讨研究化纤胶囊对PI3K/Akt信号通路的影响。本次研究：一方面通过特异性下调脂多糖(LPS)诱导细胞炎症大鼠腹主动脉内皮细胞(RAAEC)热休克蛋白A12B(HSPA12B)的表达，探讨HSPA12B对脓毒症内皮功能调控的潜在机制；另一方面通过化纤胶囊干预PI3K/Akt信号通路影响血管内皮HSPA12B的表达，对p-Akt、p-Gsk-3β、Akt、Gsk-3β、HSPA12B进行检测。研究发现特异性下调LPS诱导RAAEC细胞炎症大鼠HSPA12B的表达，能降低RAAEC对炎症反应的耐受能力，加重RAAEC损伤程度；且化纤胶囊干预后，脓毒症急性肺损伤大鼠肺泡水肿、充血减轻，TNF-α、IL-6、IL-10的水平降低，肺组织中Akt、Gsk-3β mRNA的表达上调，p-Akt、p-Gsk-3β蛋白表达上调。阐明了PI3K/Akt信号通路介导HSPA12B保护血管内皮损伤的作用机制，明确了化纤胶囊调控PI3K/Akt信号通路影响HSPA12B表达的作用机制，揭示了化纤胶囊治疗脓毒症急性肺损伤的作用机制，从分子生物学角度明确了中医药治疗脓毒症的多靶点治疗，为进一步应用于临床治疗提供理论基础和科学依据，在重症医学领域开拓了运用中西医结合的思想攻克重症领域的难题的新思路。