细胞外DNA和磷脂酰丝氨酸在非瓣膜性房颤高凝状态中的作用

More and more studies suggest that inflammation is involved in hypercoagulability of atrial fibrillation (AF), but the precise mechanism remains unclear. Our previous studies have found that neutrophils can release extracellular DNA and microparticles (MPs) into peripheral blood in patients with AF. We also found that monocytes involved in inflammation could produced MPs, these MPs and MP-origin cells expressing phosphatidylserine. In our pre-experiment, we observed extracellular DNA released from neutrophil and phosphatidylserine exposure of neutrophil are associated with coagulation in AF. So we speculate that this may be a mechanism of inflammation is involved in hypercoagulability of AF. To confirm this hypothesis, we further observated the mechanism of extracellular DNA released from neutrophil and phosphatidylserine exposed in the hypercoagulable state of AF using immunofluorescence technique in patients with non-valvular atrial fibrillation. This topic will reveal that inflammation is involved in the mechanism of hypercoagulability in AF from a new perspective, and may provide a new target for the prevention and treatment of AF thromboembolic events.

越来越多的研究认为炎症参与房颤的高凝的发生，但具体机制尚不完全清楚。我们团队在前期的研究中发现在房颤患者外周血中，中性粒细胞产生细胞外DNA和微粒，同时也发现参与炎症的单核细胞也产生微粒，这些微粒及其起源细胞表达磷脂酰丝氨酸。我们在预实验中观察到中性粒细胞释放的细胞外DNA和膜表面外翻的磷脂酰丝氨酸与房颤的凝血有关，我们推测这可能是炎症参与房颤高凝的一个机制。为证实这一假说，我们将入选非瓣膜性房颤患者，采用免疫荧光等技术，观察中性粒细胞细胞外DNA和磷脂酰丝氨酸外翻对于房颤高凝状态的作用及机制。本课题将从新的视角阐明炎症参与房颤高凝的机制，并为房颤血栓栓塞事件的防治提供新的靶点。

房颤是最常见的持续性心律失常之一，房颤患者发生血栓栓塞的风险是窦性心律者的5倍，目前认为Virchow三联征仍是导致房颤高凝状态主要机制，越来越多的研究认为磷脂酰丝氨酸及中性粒细胞胞外诱捕网与房颤的发生发展有关，还可能通过多种途径促进房颤高凝状态的形成，但具体机制尚不完全清楚。我们为证实磷脂酰丝氨酸及中性粒细胞胞外诱捕网在房颤患者高凝状态中的作用，进行了以下研究。我们采用免疫荧光及流式细胞仪等方法发现非瓣膜性房颤患者外周循环中血细胞和微粒表面的磷脂酰丝氨酸较窦性心律组明显增高，且在有左心房血栓的非瓣膜性房颤中增高的更加显著。此外，我们还发现房颤患者中表达磷脂酰丝氨酸的血细胞和微粒的凝血时间较窦性心律组明显缩短，且左心房有血栓的房颤患者的凝血时间较左心房无血栓患者显著缩短，房颤患者表达磷脂酰丝氨酸的血细胞和微粒的内源性Xa、外源性Xa、纤维蛋白较窦性心律组明显增多，且心房有血栓的房颤患者内源性Xa、外源性Xa、纤维蛋白较无血栓房颤患者显著增多。为了探究磷脂酰丝氨酸在房颤高凝中的作用，我们进行磷脂酰丝氨酸抑制实验发现，加入磷脂酰丝氨酸的抑制剂乳粘素后可显著延长左心房有血栓房颤患者的凝血时间并减少内源性Xa、外源性Xa、纤维蛋白的生成，充分地证实了磷脂酰丝氨酸在房颤患者高凝状态中发挥重要作用。此外，我们发现中性粒细胞细胞外诱捕网在非瓣膜性房颤患者中明显增高，并且中性粒细胞胞外诱捕网可以促进凝血酶复合物（TAT）的生成，为了探究中性粒细胞胞外诱捕网在房颤高凝中的作用，我们加入中性粒细胞胞外诱捕网的抑制剂DNase I后，发现在使用DNase I后TAT明显延长，说明中性粒细胞细胞外诱捕网在房颤的高凝状态中发挥重要作用。本课题阐述了磷脂酰丝氨酸及中性粒细胞胞外诱捕网在房颤患者高凝状态中的作用，为房颤高凝机制的形成提供了一个新视角，也为房颤血栓栓塞事件的防治提供了一个新的治疗靶点。