生物膜滤过对中药指纹图谱变化，谱效差异及应用于口服定位释放制剂设计的研究

有效成分群经胃肠道转运进入血循环是发挥中药口服给药疗效的关键之一。我们已经发现京大戟水提物（JDJSTW）是强烈的P-糖蛋白（P-gp）抑制剂，故采用Ussing Chamber 技术，模拟体内肠道生理环境，研究JDJSTW经不同肠道生物膜滤过前后成分群的指纹图谱；再选择P-gp底物紫杉醇，以口服JDJSTW后的含药血清对照，研究JDJSTW滤过前后对肿瘤细胞P-gp表达的变化和对紫杉醇被转移到细胞中的程度差异等，来分析生物膜滤过对JDJSTW逆转P-gp相关耐药性、协同紫杉醇抗肿瘤增敏特性，构建谱效关系。作为验证，以合适的紫杉醇和JDJSTW配比，采用肠溶技术制备肠段定位释放JDJSTW紫杉醇胶囊，进行生物药剂学和药效评价，证明优选的口服"定位"复方制剂有利于提高紫杉醇的吸收和靶组织分布量及增敏其杀伤卵巢癌作用。项目也为口服中药制剂组方及评价体系等建立一种有效实用的新的实验手段提供依据。

本项目主要研究生物膜滤过对中药指纹图谱变化，谱效差异及应用于口服定位释放制剂设计。建立京大戟水提物和醇提物的HPLC 指纹图谱，经肠道不同区段肠粘膜滤过液的HPLC指纹图谱，然后通过HPLC、LC-MS、体内外实验等技术分析大鼠灌胃各样品液后相关值的变化。体外Ussing chamber实验中发现京大戟提取物可显著降低P-gp 底物罗丹明123(R123)分泌方向的转运，同时提高吸收方向的转运，并对大鼠肠粘膜P-gp的mdrla基因表达有降低的趋势。因此，我们采用Ussing chamber实验，将京大戟等P-gp抑制剂和P-gp的底物紫杉醇联用，证明京大戟确实能显著提高紫杉醇吸收透过。同时在In vivo 实验中，我们用P-gp抑制剂给大鼠灌胃后，观察到紫杉醇在血浆中药物浓度和各种药动学参数的改变，实验组紫杉醇的生物利用度和曲线下面积显著大于对照组。并且从细胞的水平评价京大戟的毒性和抑瘤作用。进一步证明京大戟是一种较强的P-gp 抑制剂。并且用一种肠溶胶囊进行了验证，但是没有发现明显的定位作用差异。