基于蛋白质组学的冻干赋形鲜动物药活性变化规律研究

中药鹿茸是传统名贵中药材，是血肉有情之品的重要代表，现代研究含有大量活性生物因子，因技术条件所限，传统采用热炸工艺炮制以保存和应用。冻干赋形技术是一项通过活性物质与辅料的精确处方和全过程冷冻干燥而赋型的速释制剂，对促进鲜动物药的活性物质保护和吸收是有突出优势，研究鲜动物药冻干赋形过程中的活性变化规律，对改进工艺条件、提高生物活性具有指导意义。本研究以鹿茸为研究载体，利用蛋白质组指纹图谱技术跟踪冻干赋形过程中活性成分变化，建立同时体现化学和分子生物效应信息的蛋白质指纹图谱数据库，通过数据处理和分析研究匀浆、冻干赋形、载药量等关键环节和工艺条件对鲜动物药活性成分影响的规律，为改善冻干赋形工艺条件，提高鲜动物药生物活性保护效率提供科学依据。研究结果不但对冻干赋形技术本身具有指导意义，而且对同类研究具有借鉴价值，中药制剂工艺的完善与提高产生积极的推动作用。

中药鹿茸是传统名贵中药材，是血肉有情之品的重要代表，现代研究表明鹿茸中含有大量活性生物因子，但因技术条件所限，常采用热炸和水煮等热加工工艺炮制以保存和应用，这使得鹿茸中的不耐热的蛋白类成分受到破坏。冻干赋形技术是一项通过活性物质与辅料的精确处方和全过程冷冻干燥而赋型的速释制剂，对促进鲜动物药的活性物质保护和吸收是有突出优势，研究鲜动物药冻干赋形过程中的活性变化规律，对改进鲜活动物药的炮制工艺、提高生物活性具有指导意义。本研究以鹿茸为研究载体，利用蛋白质组技术跟踪冻干赋形过程中活性成分变化，通过研究匀浆、冻干赋形、等关键环节和工艺条件对鲜动物药活性成分影响的规律，为改善冻干赋形工艺条件，提高鲜动物药生物活性保护效率提供科学依据。.在蛋白质组学方面，采用Bradford法和Elasa法建立不同鹿茸制品不同部位的可溶性蛋白和生物活性因子的含量的方法，并结合双向凝胶电泳和基质辅助激光解吸附电离偶联飞行时间质谱技术（MOLDI-TOF）获得鲜鹿茸不同部位的指纹图谱，结果表明上述方法测定鹿茸种的可溶性蛋白和生物活性因子类成分具有可行性和重复性,显示可溶性蛋白和生物活性因子含量在鲜鹿茸中呈现从上至下依次降低的趋势，鹿茸经过炮制后其不同部位的可溶性蛋白和生物活性因子含量明显降低，说明鹿茸经过传统炮制可使其不耐热和水溶性蛋白类成分显著降低，这不利于发挥鹿茸的最大药效。与此同时，本研究建立了采用MTT法评价不同鹿茸产品的总生物活性的方法，结果表明以NRK-49F细胞为模型细胞评价鹿茸在冻干赋形过程的生物活性更具有合理性。.在制剂学方面，本研究主要以生物活性为指标，确定鲜鹿茸全成分冻干赋性制剂的关键工艺影响因素，获得了活性较高、含水量低于7%、30s内完全复溶的全成分鲜鹿茸冻干赋形制剂工艺条件。.本课题以蛋白质组学作为主要研究方法，跟踪了冻干赋形过程中活性成分变化，发现了同时体现化学和分子生物效应的蛋白质信息，分析并获得了匀浆、冻干赋形、载药量等关键环节和工艺条件对鲜动物药活性成分影响的规律，为改善冻干赋形工艺条件，提高鲜动物药生物活性保护效率提供科学依据。本研究发表核心科研论文6篇，申请专利4项，培养博士研究生1名、硕士研究生6名、本科生4名。