抗逆转录病毒药物在中枢神经系统的相互作用及其对ABC细胞膜药物转运蛋白的影响

病毒耐药是HAART治疗失败最主要原因。分布于中枢内皮、胶质ABC细胞膜的药物转运体蛋白在CNS血脑屏障和脑脊液屏障间组成了一道主动逆ART药物浓度运输屏障，使CNS成为体内HIV躲避ART攻击的神龛和病毒储库及HIV在体内发生耐药突变的理想部位。清除CNS内HIV、避免因长期使用ART诱导ABC细胞膜药物转运体蛋白表达是目前HAART最迫切的问题。鉴于此本项目拟在大鼠及培养胶质细胞模型上，利用形态、分子生物及高效液相-质谱法研究ART组分对CNS ABC细胞膜药物转运体蛋白表达影响及在CNS ART药物间浓度相互作用；在AIDS志愿者采用体内ABC细胞膜药物转运体蛋白表达水平监测，高效液相-质谱联用法研究CNS内ART组分间浓度相互影响。旨在阐明ART对CNS ABC细胞膜药物转运体蛋白的影响及在CNS ART药物间浓度分布相互作用，为预防HIV耐药性、指导AIDS个体化治疗提供实验依据

如何清除CNS内HIV-1、避免或减轻ART长期使用诱导ABC药物转运蛋白的表达已经是目前HAART最为迫切的问题之一。尽管人们已经认识到ABC药物转运蛋白在ART药物代谢中的关键作用，但是其与抗病毒药物相互作用的具体机制仍然有待阐明，特别是缺乏较大HIV感染样本的队列研究的依据。为此，我们在SD大鼠及原代培养的SD大鼠大脑皮质星状胶质细胞模型上研究ART药物对ABC药物转运蛋白的诱导及其影响，对HIV-1感染人群外周血单个核细胞中ABC药物转运蛋白的表达进行了初步的研究，希望能够为预防HIV耐药产生本研究利用差速黏附原理进行SD大鼠星形胶质细胞的原代分离和培养，在培养的细胞中增加不同ART药物观察其对星形胶质细胞ATP酶活力的诱导作用，从而间接了解ABC药物转运蛋白的功能及活力变化；使用无机磷法测定酶活性，观察给予不同ART药物喂养的SD大鼠脑组织中Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和Mg2+-ATP酶活性的变化；应用实时定量PCR技术和流式细胞术，对118例HIV-1感染者体内ABCB1药物转运蛋白的表达水平进行了检测，特别是结合病毒学和免疫学资料对48例应用ART药物的HIV-1感染者进行了分类研究，并尝试使用受试者操作特征曲线分析ABCB1的表达与患者应用ART药物治疗的相关性，较深入的了解了ART药物对ABC药物转运蛋白的诱导作用，及ABC药物转运蛋白对HIV感染后应用抗病毒治疗的治疗反应的监测效果。我们发现：ART药物对ABC药物转运蛋白有诱导作用；不同ART药物对不同ABC药物转运蛋白的诱导效应不同；应用ART药物的HIV-1感染者外周血ABCB1+CD8+比例显著高于从未使用ART药物的HIV-1感染者以及健康对照者；检测ABCB1+CD8+T细胞比例对抗病毒治疗反应有良好的监测效果，这为进一步治愈HIV感染、完善HAART治疗措施、寻找新的潜在的抗病毒治疗方案提供了一条出路。