利用随机RNAi文库筛选Oct-4和Nanog的相关调控分子

胚胎干细胞具有自我更新和多向分化潜能，其相关调控机制的研究对于大量制备干细胞、高效诱导定向分化以用于疾病的治疗、以及了解胚胎发育和肿瘤发生的分子机制等有重要的意义。目前认为，Oct-4和Nanog是维持胚胎干细胞多能性的两个最关键内源性分子，但对其信号传递通路还知之甚少，因此找出并明确其相关的调控分子非常必要。本课题拟利用我们自行设计并建立的随机RNAi文库这一技术平台，以含有Oct-4或Nanog报告基因载体的胚胎干细胞系作为细胞模型（报告基因为潮霉素和EGFP融合表达蛋白基因），通过转染和筛选随机RNAi文库，找到可能参与调控Oct-4和Nanog的信号分子，并通过功能实验初步鉴定筛选到的单个基因在胚胎干细胞自我更新与分化信号转导通路中的作用，为相应调控机制的探索及干细胞的临床应用奠定理论基础。