心脏和骨骼肌特异表达基因KLHL31在心脏左右不对称形态发育中的功能研究

申请人克隆了在心脏和骨骼肌特异表达的高度进化保守的人类新基因KLHL31，经酵母双杂交等多项技术证明，该基因与Nodal信号途径新成员NOMO相互作用,提示它可能是Nodal信号途径的新成员，与NOMO形成复合体协同调控心脏左右不对称形态的发育。申请人"敲除"斑马鱼KLHL31基因的初步观察结果也显示它可能与心脏左右不对称形态发育有关。目前尚无该基因的功能研究报道。因此，本项目拟进一步用模式生物斑马鱼和AC16心肌细胞系为模型，深入研究该基因的生物学功能：1）利用胚胎原位杂交等技术研究KLHL31基因在胚胎发育阶段的时空表达模式；2）利用Morpholinos反义寡核酸阻断翻译和加帽mRNA拯救等技术，鉴定KLHL31在心脏发育中的功能；3）结合细胞模型研究KLHL31对心脏左右不对称形态发育的分子调控机制。本项目将揭示KLHL31在脊椎动物心脏发育中的功能及其分子机制。