转T-bet肿瘤特异T细胞凋亡调控机制及抗肿瘤效应实验研究

一、从肝癌患者外周血分离纯化T细胞和DC，然后用分离纯化的DC吞噬凋亡肝癌细胞后与T细胞混合培养，刺激肿瘤特异性Tc和Th细胞扩增。二、从健康人外周血T细胞总RNA中扩增T-bet cDNA、Fas cDNA和c-FLIP-short cDNA，分别克隆并构建真核表达载体pEGFP/T-bet和pEGFP/c-FLIP以及双价真核表达载体pEGFP/T-bet/AS Fas、pEGFP/T-bet-IRES-c-FLIP，通过转T-bet基因调整Th1/Th2比例失衡，运用转入反义Fas基因或c-FLIP基因来调控CTL的细胞凋亡。三、观察反义Fas基因、c-FLIP基因对T细胞凋亡及其相关分子的影响，以期进一步阐明CTL细胞凋亡及抗凋亡的机制，为恶性肿瘤的过继免疫治疗提供更高效、特异的免疫活性细胞。四、在体内外水平评价各型肿瘤特异性CTL的抗肿瘤效应，为肝癌的防治提供新的手段和思路。